食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2015年
13期
101-106
,共6页
副溶血性弧菌%整合接合元件%实时荧光定量聚合酶链式反应%基因表达
副溶血性弧菌%整閤接閤元件%實時熒光定量聚閤酶鏈式反應%基因錶達
부용혈성호균%정합접합원건%실시형광정량취합매련식반응%기인표체
Vibrio parahaemolyticus%integrative and conjugative elements%real-time polymerase chain reaction%gene expression
采用实时荧光定量聚合酶链式反应方法分析在15～42℃温度范围内副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)CHN25整合接合元件(integrative and conjugative elements,ICEs)ICEVpaChn1核心基因表达对温度变化的响应.结果表明:温度介导ICEVpaChn1元件保守模块核心基因表达发生显著变化,其中,编码进入排斥蛋白Eex (entry exclusion)的基因对温度变化最为敏感,低于或高于37℃的温度条件均强烈抑制eex基因表达(＞10倍).此外,在15～37℃范围内,温度的升高显著激活编码整合酶Int (integrase)、接合转移蛋白TraⅠ(transfer protein Ⅰ)和TraG、DNA修复蛋白RumA基因的表达,且在37℃达到最大值;与其他检测基因明显不同,温度升高抑制转录抑制子SetR基因的表达,促进int等基因转录激活子SetC和SetD的积累,进而刺激切离,促进ICE VpaChn1元件的接合转移.实验结果揭示了环境温度对ICEs元件核心基因表达的影响,发现低温(＜15℃)和高温(＞37℃)条件均可能阻遏ICEVpaChn1元件及其携带基因信息在不同种属细菌间的接合转移.
採用實時熒光定量聚閤酶鏈式反應方法分析在15～42℃溫度範圍內副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)CHN25整閤接閤元件(integrative and conjugative elements,ICEs)ICEVpaChn1覈心基因錶達對溫度變化的響應.結果錶明:溫度介導ICEVpaChn1元件保守模塊覈心基因錶達髮生顯著變化,其中,編碼進入排斥蛋白Eex (entry exclusion)的基因對溫度變化最為敏感,低于或高于37℃的溫度條件均彊烈抑製eex基因錶達(＞10倍).此外,在15～37℃範圍內,溫度的升高顯著激活編碼整閤酶Int (integrase)、接閤轉移蛋白TraⅠ(transfer protein Ⅰ)和TraG、DNA脩複蛋白RumA基因的錶達,且在37℃達到最大值;與其他檢測基因明顯不同,溫度升高抑製轉錄抑製子SetR基因的錶達,促進int等基因轉錄激活子SetC和SetD的積纍,進而刺激切離,促進ICE VpaChn1元件的接閤轉移.實驗結果揭示瞭環境溫度對ICEs元件覈心基因錶達的影響,髮現低溫(＜15℃)和高溫(＞37℃)條件均可能阻遏ICEVpaChn1元件及其攜帶基因信息在不同種屬細菌間的接閤轉移.
채용실시형광정량취합매련식반응방법분석재15～42℃온도범위내부용혈성호균(Vibrio parahaemolyticus)CHN25정합접합원건(integrative and conjugative elements,ICEs)ICEVpaChn1핵심기인표체대온도변화적향응.결과표명:온도개도ICEVpaChn1원건보수모괴핵심기인표체발생현저변화,기중,편마진입배척단백Eex (entry exclusion)적기인대온도변화최위민감,저우혹고우37℃적온도조건균강렬억제eex기인표체(＞10배).차외,재15～37℃범위내,온도적승고현저격활편마정합매Int (integrase)、접합전이단백TraⅠ(transfer protein Ⅰ)화TraG、DNA수복단백RumA기인적표체,차재37℃체도최대치;여기타검측기인명현불동,온도승고억제전록억제자SetR기인적표체,촉진int등기인전록격활자SetC화SetD적적루,진이자격절리,촉진ICE VpaChn1원건적접합전이.실험결과게시료배경온도대ICEs원건핵심기인표체적영향,발현저온(＜15℃)화고온(＞37℃)조건균가능조알ICEVpaChn1원건급기휴대기인신식재불동충속세균간적접합전이.
