广东海洋大学学报
廣東海洋大學學報
엄동해양대학학보
JOURNAL OF GUANGDONG OCEAN UNIVERSITY
2015年
4期
56-62
,共7页
闫秀英%郭定利%郑树城%王雅%谢吉国%简纪常%吴灶和
閆秀英%郭定利%鄭樹城%王雅%謝吉國%簡紀常%吳竈和
염수영%곽정리%정수성%왕아%사길국%간기상%오조화
草鱼呼肠孤病毒%vp4基因%生物信息学%真核表达
草魚呼腸孤病毒%vp4基因%生物信息學%真覈錶達
초어호장고병독%vp4기인%생물신식학%진핵표체
grass carp reovirus strain 096 (GCRV 096)%the vp4 gene%bioinformatics%eukaryotic expression
克隆得一株新分离病毒草鱼呼肠孤病毒(GCRV)096的长为1981 bp 的 vp4基因,分析该基因的生物信息及其编码蛋白的特性。生物信息学分析表明,同一基因型 GCRV 分离株 vp4基因间的差异不大,但不同基因型GCRV 分离株 vp4基因间却存在很大的差异。GCRV 096 VP4蛋白含有多个功能位点、2个跨膜结构域及多个潜在的抗原决定簇。构建 pEGFP-N3-VP4真核表达质粒,并转染至草鱼肾(Ctenopharyngodon idellus kidney, CIK)细胞中,经荧光显微镜观察和 Western blot 鉴定,表明 GCRV 096 VP4融合蛋白在 CIK 细胞中得以成功表达。
剋隆得一株新分離病毒草魚呼腸孤病毒(GCRV)096的長為1981 bp 的 vp4基因,分析該基因的生物信息及其編碼蛋白的特性。生物信息學分析錶明,同一基因型 GCRV 分離株 vp4基因間的差異不大,但不同基因型GCRV 分離株 vp4基因間卻存在很大的差異。GCRV 096 VP4蛋白含有多箇功能位點、2箇跨膜結構域及多箇潛在的抗原決定簇。構建 pEGFP-N3-VP4真覈錶達質粒,併轉染至草魚腎(Ctenopharyngodon idellus kidney, CIK)細胞中,經熒光顯微鏡觀察和 Western blot 鑒定,錶明 GCRV 096 VP4融閤蛋白在 CIK 細胞中得以成功錶達。
극륭득일주신분리병독초어호장고병독(GCRV)096적장위1981 bp 적 vp4기인,분석해기인적생물신식급기편마단백적특성。생물신식학분석표명,동일기인형 GCRV 분리주 vp4기인간적차이불대,단불동기인형GCRV 분리주 vp4기인간각존재흔대적차이。GCRV 096 VP4단백함유다개공능위점、2개과막결구역급다개잠재적항원결정족。구건 pEGFP-N3-VP4진핵표체질립,병전염지초어신(Ctenopharyngodon idellus kidney, CIK)세포중,경형광현미경관찰화 Western blot 감정,표명 GCRV 096 VP4융합단백재 CIK 세포중득이성공표체。
GCRV 096 is a new grass carp reovirus strain. The vp4 gene 1 981 bp in length in GCRV 096 is cloned, and the characteristics of the vp4 genes and the VP4 proteins in GCRVs are analyzed. Results of bioinformatics analysis show that there is little difference between the vp4 genes in GCRV strains attributed to the same genotype, but the difference between vp4 genes in GCRV strains attributed to different genotypes is much more. The VP4 protein contains multiple functional sites, two transmembrane domain and many potential antigenic eukaryotic determinants. Furthermore, the expression plasmid pEGFP-N3-VP4 of the vp4 gene in GCRV 096 is constructed and transformed into Ctenopharyngodon idellus kidney (CIK) cells. Fluorescence microscope and western blot results indicate that the VP4 fusion protein is successfully expressed in CIK cells.