中国科学技术大学学报
中國科學技術大學學報
중국과학기술대학학보
JOURNAL OF UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY OF CHINA
2015年
8期
643-648
,共6页
caspase-3%纳米粒子%荧光淬灭
caspase-3%納米粒子%熒光淬滅
caspase-3%납미입자%형광쉬멸
caspase-3%nanoparticle%fluorescence quenching effect
半胱氨酸蛋白酶‐3（caspase‐3）是细胞凋亡过程中的主要效应子之一，在多种疾病的检测中扮演重要角色，对其在低浓度下的检测是早期发现肿瘤细胞的有效手段。参考近期发现的 caspase‐3剪切诱导发生的高效缩合反应，设计了化合物 Ac‐Asp‐Glu‐Val‐Asp‐Cys（StBu）‐Lys（FITC）‐CBT （1），通过 TCEP（三（2‐羧乙基）膦）还原以及在细胞凋亡过程中高表达的 caspase‐3的特异性识别剪切后发生缩合反应，其二聚体产物亲脂亲水性发生变化，可以自组装形成纳米粒子，并由于聚集荧光淬灭效应导致荧光强度较反应前大幅降低，从而实现 caspase‐3的检测。反应生成的纳米粒子通过高效液相色谱、动态光散射仪以及透射电镜等手段进行表征，表明化合物1可以在低物质的量浓度下由几个单位的蛋白酶成功剪切缩合并自组装成纳米荧光探针，其荧光强度降低幅度与酶的含量在一定范围内成线性关系，可用于 caspase‐3酶在低浓度下的检测。
半胱氨痠蛋白酶‐3（caspase‐3）是細胞凋亡過程中的主要效應子之一，在多種疾病的檢測中扮縯重要角色，對其在低濃度下的檢測是早期髮現腫瘤細胞的有效手段。參攷近期髮現的 caspase‐3剪切誘導髮生的高效縮閤反應，設計瞭化閤物 Ac‐Asp‐Glu‐Val‐Asp‐Cys（StBu）‐Lys（FITC）‐CBT （1），通過 TCEP（三（2‐羧乙基）膦）還原以及在細胞凋亡過程中高錶達的 caspase‐3的特異性識彆剪切後髮生縮閤反應，其二聚體產物親脂親水性髮生變化，可以自組裝形成納米粒子，併由于聚集熒光淬滅效應導緻熒光彊度較反應前大幅降低，從而實現 caspase‐3的檢測。反應生成的納米粒子通過高效液相色譜、動態光散射儀以及透射電鏡等手段進行錶徵，錶明化閤物1可以在低物質的量濃度下由幾箇單位的蛋白酶成功剪切縮閤併自組裝成納米熒光探針，其熒光彊度降低幅度與酶的含量在一定範圍內成線性關繫，可用于 caspase‐3酶在低濃度下的檢測。
반광안산단백매‐3（caspase‐3）시세포조망과정중적주요효응자지일，재다충질병적검측중분연중요각색，대기재저농도하적검측시조기발현종류세포적유효수단。삼고근기발현적 caspase‐3전절유도발생적고효축합반응，설계료화합물 Ac‐Asp‐Glu‐Val‐Asp‐Cys（StBu）‐Lys（FITC）‐CBT （1），통과 TCEP（삼（2‐최을기）련）환원이급재세포조망과정중고표체적 caspase‐3적특이성식별전절후발생축합반응，기이취체산물친지친수성발생변화，가이자조장형성납미입자，병유우취집형광쉬멸효응도치형광강도교반응전대폭강저，종이실현 caspase‐3적검측。반응생성적납미입자통과고효액상색보、동태광산사의이급투사전경등수단진행표정，표명화합물1가이재저물질적량농도하유궤개단위적단백매성공전절축합병자조장성납미형광탐침，기형광강도강저폭도여매적함량재일정범위내성선성관계，가용우 caspase‐3매재저농도하적검측。
Caspase‐3 is a very important protease in cell apoptosis and plays a crucial role in many diseases . A new probe Ac‐Asp‐Glu‐Val‐Asp‐Cys(StBu)‐Lys(FITC)‐CBT (1) was reported ,which can be reduced by TCEP and cleaved by caspase‐3 to yield the amphiphilic dimer (1‐D) .1‐D can quickly self‐assemble into nanoparticles to induce a clear fluorescence quenching effect because of the aggregation‐caused quench .The nanoparticles were characterized by means of dynamic light scattering (DLS ) , transmission electron microscope (TEM ) ,and high performance liquid chromatography (HPLC) .As a result ,the fluorescence intensity has a linear correlation with the concentration of caspase‐3 ,which could be applied to sensing caspase‐3 activity in vivo in the future .
