华东理工大学学报：社会科学版
華東理工大學學報：社會科學版
화동리공대학학보：사회과학판
SOCIAL SCIENCES JOURNAL OF ECUST
2006年
12期
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张海毅 李志敏 钱悦 张倩 甘人宝 叶勤
張海毅 李誌敏 錢悅 張倩 甘人寶 葉勤
장해의 리지민 전열 장천 감인보 협근
人表皮生长因子 PL启动子 分泌 大肠杆菌
人錶皮生長因子 PL啟動子 分泌 大腸桿菌
인표피생장인자 PL계동자 분비 대장간균
human epidermal growth factor; P_L promoter; secretion; Escherichia coli;
采用一株大肠杆菌BL 21(DE 3)[pBLMVL 2EGF]生产人表皮生长因子(hEGF),其中hEGF表达由PL启动子控制并通过phoA信号肽分泌到胞外。实验结果表明:诱导阶段以恒定比供应速率流加葡萄糖时,流加速率对hEGF的表达和分泌有很大影响。当葡萄糖比供应速率为0.122g/(g.h)时,hEGF表达水平最低,分泌效率最差,只有37.5%;随着葡萄糖比供应速率的增加,胞外和胞内hEGF比生产速率明显增加,当葡萄糖比供应速率为0.196 g/(g.h)时,单位菌体产生的hEGF水平最高(121.6 m g/g),其中分泌至胞外的hEGF占42%。此外,诱导前补充有机氮源有利于提高诱导初始hEGF的生产速率。
採用一株大腸桿菌BL 21(DE 3)[pBLMVL 2EGF]生產人錶皮生長因子(hEGF),其中hEGF錶達由PL啟動子控製併通過phoA信號肽分泌到胞外。實驗結果錶明:誘導階段以恆定比供應速率流加葡萄糖時,流加速率對hEGF的錶達和分泌有很大影響。噹葡萄糖比供應速率為0.122g/(g.h)時,hEGF錶達水平最低,分泌效率最差,隻有37.5%;隨著葡萄糖比供應速率的增加,胞外和胞內hEGF比生產速率明顯增加,噹葡萄糖比供應速率為0.196 g/(g.h)時,單位菌體產生的hEGF水平最高(121.6 m g/g),其中分泌至胞外的hEGF佔42%。此外,誘導前補充有機氮源有利于提高誘導初始hEGF的生產速率。
채용일주대장간균BL 21(DE 3)[pBLMVL 2EGF]생산인표피생장인자(hEGF),기중hEGF표체유PL계동자공제병통과phoA신호태분비도포외。실험결과표명:유도계단이항정비공응속솔류가포도당시,류가속솔대hEGF적표체화분비유흔대영향。당포도당비공응속솔위0.122g/(g.h)시,hEGF표체수평최저,분비효솔최차,지유37.5%;수착포도당비공응속솔적증가,포외화포내hEGF비생산속솔명현증가,당포도당비공응속솔위0.196 g/(g.h)시,단위균체산생적hEGF수평최고(121.6 m g/g),기중분비지포외적hEGF점42%。차외,유도전보충유궤담원유리우제고유도초시hEGF적생산속솔。
A recombinant strain,Escherichia coli BL21(DE3)[pBLMVL2EGF],was used for the(secretory) production of human epidermal growth factor(hEGF).The expression of the gene coding for hEGF,which was inserted behind the phoA signal sequence,was under the control of P_L promoter.During the expression phase,glucose was added at constant specific provision rates,which had a great influence on the production and secretion of hEGF.When fed with glucose at a specific provision rate of 0.122 g/((g·h)),the hEGF production l...
