华东理工大学学报:社会科学版
華東理工大學學報:社會科學版
화동리공대학학보:사회과학판
SOCIAL SCIENCES JOURNAL OF ECUST
2004年
6期
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谢静莉 周庆玮 杜鹏 甘人宝 叶勤
謝靜莉 週慶瑋 杜鵬 甘人寶 葉勤
사정리 주경위 두붕 감인보 협근
巴斯德毕赤酵母 血管生长抑制素 发酵 铵离子浓度
巴斯德畢赤酵母 血管生長抑製素 髮酵 銨離子濃度
파사덕필적효모 혈관생장억제소 발효 안리자농도
Pichia pastoris; angiostatin; fermentation; ammonium concentration;
采用MutS表型的重组毕赤酵母生产血管生长抑制素,表达阶段流加甘油-甲醇混合碳源以提高菌体密度和血管生长抑制素的表达水平,菌体密度可达174g/L,约是表达阶段采用甲醇为单一碳源的发酵过程的3倍。菌体密度的提高导致表达阶段发酵液中铵离子浓度下降很快,当发酵液中的铵离子浓度低至40mmol/L时,影响了血管生长抑制素的表达。改变pH调节方式并在发酵后期添加25mmol/L(NH4)2SO4使发酵液中铵离子浓度维持在150mmol/L以上,血管生长抑制素的表达产量达到108mg/L。
採用MutS錶型的重組畢赤酵母生產血管生長抑製素,錶達階段流加甘油-甲醇混閤碳源以提高菌體密度和血管生長抑製素的錶達水平,菌體密度可達174g/L,約是錶達階段採用甲醇為單一碳源的髮酵過程的3倍。菌體密度的提高導緻錶達階段髮酵液中銨離子濃度下降很快,噹髮酵液中的銨離子濃度低至40mmol/L時,影響瞭血管生長抑製素的錶達。改變pH調節方式併在髮酵後期添加25mmol/L(NH4)2SO4使髮酵液中銨離子濃度維持在150mmol/L以上,血管生長抑製素的錶達產量達到108mg/L。
채용MutS표형적중조필적효모생산혈관생장억제소,표체계단류가감유-갑순혼합탄원이제고균체밀도화혈관생장억제소적표체수평,균체밀도가체174g/L,약시표체계단채용갑순위단일탄원적발효과정적3배。균체밀도적제고도치표체계단발효액중안리자농도하강흔쾌,당발효액중적안리자농도저지40mmol/L시,영향료혈관생장억제소적표체。개변pH조절방식병재발효후기첨가25mmol/L(NH4)2SO4사발효액중안리자농도유지재150mmol/L이상,혈관생장억제소적표체산량체도108mg/L。
In fed-batch cultivation of recombinant Pichia pastoris (Mut~S phenotype), feeding with glycerol and methanol was conducted during the expression phase to enhance the cell growth and angiostatin expression. The cell density reached 174 g/L at the end of fermentation, which was about 3 fold of that obtained with methanol as the sole carbon source in the induction phase. High cell density resulted in a quick drop of ammonium concentration in the fermentation broth, and when the ammonium concentration was belo...