孝感学院学报
孝感學院學報
효감학원학보
JOURNAL OF XIAOGAN UNIVERSITY
2008年
6期
16~19
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邹礼平 高和平 钟亚琴 陈锦华
鄒禮平 高和平 鐘亞琴 陳錦華
추례평 고화평 종아금 진금화
番茄 八氢番茄红素合成酶 基因克隆 表达载体
番茄 八氫番茄紅素閤成酶 基因剋隆 錶達載體
번가 팔경번가홍소합성매 기인극륭 표체재체
tomato; phytoene synthase; gene cloning; expression vector
八氢番茄红素合成酶是植物类胡萝卜素生物合成途径中促进番茄红素合成的关键酶，根据番茄该酶的编码基因序列设计一对引物，通过RT--PCR在番茄中扩增出一个约1500bp的全长cDNA片段。测序结果表明，此片段包含一个长为1239bp的完整的编码框，其氨基酸序列与辣椒、向日葵、万寿菊、枸杞、番木瓜、温州蜜柑、拟南芥八氢番茄红素合成酶基因编码的氨基酸序列的一致率分别为88％、75％、75％、74％、73％、73％、71％。对这个全长片段构建了超量表达载体，酶切检测表明该片段已插入植物表达载体。
八氫番茄紅素閤成酶是植物類鬍蘿蔔素生物閤成途徑中促進番茄紅素閤成的關鍵酶，根據番茄該酶的編碼基因序列設計一對引物，通過RT--PCR在番茄中擴增齣一箇約1500bp的全長cDNA片段。測序結果錶明，此片段包含一箇長為1239bp的完整的編碼框，其氨基痠序列與辣椒、嚮日葵、萬壽菊、枸杞、番木瓜、溫州蜜柑、擬南芥八氫番茄紅素閤成酶基因編碼的氨基痠序列的一緻率分彆為88％、75％、75％、74％、73％、73％、71％。對這箇全長片段構建瞭超量錶達載體，酶切檢測錶明該片段已插入植物錶達載體。
팔경번가홍소합성매시식물류호라복소생물합성도경중촉진번가홍소합성적관건매，근거번가해매적편마기인서렬설계일대인물，통과RT--PCR재번가중확증출일개약1500bp적전장cDNA편단。측서결과표명，차편단포함일개장위1239bp적완정적편마광，기안기산서렬여랄초、향일규、만수국、구기、번목과、온주밀감、의남개팔경번가홍소합성매기인편마적안기산서렬적일치솔분별위88％、75％、75％、74％、73％、73％、71％。대저개전장편단구건료초량표체재체，매절검측표명해편단이삽입식물표체재체。
Phytoene synthase （PSY） is a key enzyme in the carotenoid biosynthetic pathway. A 1500 bp full-length cDNA fragment was amplified by RT-PCR from tomato using a pair of specific primers based on the coding sequence of PSY. This fragment contained a complete ORF of 1239 bp. The deduced amino acid showed 88%, 75%, 75%, 74%, 73%, 73% and 71% homology with PSY from hot pepper, sunflower, marigold, medlar, papaya, satsuma mandarin and Arabidopsis thaliana, respectively. Using the amplified fragment, the over-expression vector was constructed and identified by digestion with appropriate enzymes.
