CAJ | 학술논문

目的：观察运动性免疫失衡对调控骨髓早期B细胞分化发育的特异性转录因子的影响。方法：SPF级雄性SD大鼠128只，随机分为绝对安静组（Absolute control，简称AC组），运动前安静组（Control，简称A组）、运动后即刻组（Immediate简称J组）、运动后3 h组（3 Hours，简称3H组），进行6周递增负荷跑台运动，分别在第0、2、4、6周末用实时荧光定量PCR、Western Blot或脱钙股骨免疫组化检测其骨髓中转录因子E2A、EBF、PAX5的蛋白及基因表达。结果：6周递增负荷运动中，在第0周，各组间E2A、EBF、PAX5蛋白表达均无显著性差异（P〉0.05），而J组的EBF基因表达已呈显著性下降（P〈0.05）；第2周，与A组相比，J组E2A、EBF蛋白表达均显著性下降（P〈0.05），而PAX5蛋白仅3H组呈显著性上升（P〈0.05），并且3H组仅EBF基因表达具显著性低下（P〈0.05）；第4周，J组EBF蛋白有非常显著性下降（P〈0.01），3H组有显著性上升（P〈0.05），EBF、PAX5基因表达呈显著性下降（P〈0.05）；第6周，PAX5蛋白在3H组有显著性上升（P〈0.05）。EBF，PAX5与Pro B、Pre B数量百分比之间呈较高正性相关系数（EBF蛋白表达与Pro B、Pre B的相关性分别为0.82、0.89；PAX5蛋白表达与Pro B、Pre B的相关性分别为0.81、0.87；EBFmRNA与Pro B、Pre B的相关性分别为0.89、0.92）。结论与建议：1）6周递增负荷运动过程中，E2A蛋白受运动的影响，波动幅度较小，EBF、PAX5则波动幅度较大。EBF、PAX5与骨髓pro B、pre B细胞数的相关度再次提示转录因子EBF、PAX5对发育中pro B、pre B细胞数量起主导调控作用。2）E2A、PAX5的蛋白与基因表达不同步，提示基因表达对蛋白质合成只是具有指导性合成的作用，还与合成酶的活性、合成底物的充足与否等多种因素有关，此外，还可能涉及基因转录后调控机制，有待进一步研究证实。3）EBFmRNA在WK0 呈现波动，提示EBF基因的转录对运动刺激更为敏感，并发现EBF比上级调控因子E2A和下游调控因子PAX5对B细胞发育的主导调控作用更加关键。目的：觀察運動性免疫失衡對調控骨髓早期B細胞分化髮育的特異性轉錄因子的影響。方法：SPF級雄性SD大鼠128隻，隨機分為絕對安靜組（Absolute control，簡稱AC組），運動前安靜組（Control，簡稱A組）、運動後即刻組（Immediate簡稱J組）、運動後3 h組（3 Hours，簡稱3H組），進行6週遞增負荷跑檯運動，分彆在第0、2、4、6週末用實時熒光定量PCR、Western Blot或脫鈣股骨免疫組化檢測其骨髓中轉錄因子E2A、EBF、PAX5的蛋白及基因錶達。結果：6週遞增負荷運動中，在第0週，各組間E2A、EBF、PAX5蛋白錶達均無顯著性差異（P〉0.05），而J組的EBF基因錶達已呈顯著性下降（P〈0.05）；第2週，與A組相比，J組E2A、EBF蛋白錶達均顯著性下降（P〈0.05），而PAX5蛋白僅3H組呈顯著性上升（P〈0.05），併且3H組僅EBF基因錶達具顯著性低下（P〈0.05）；第4週，J組EBF蛋白有非常顯著性下降（P〈0.01），3H組有顯著性上升（P〈0.05），EBF、PAX5基因錶達呈顯著性下降（P〈0.05）；第6週，PAX5蛋白在3H組有顯著性上升（P〈0.05）。EBF，PAX5與Pro B、Pre B數量百分比之間呈較高正性相關繫數（EBF蛋白錶達與Pro B、Pre B的相關性分彆為0.82、0.89；PAX5蛋白錶達與Pro B、Pre B的相關性分彆為0.81、0.87；EBFmRNA與Pro B、Pre B的相關性分彆為0.89、0.92）。結論與建議：1）6週遞增負荷運動過程中，E2A蛋白受運動的影響，波動幅度較小，EBF、PAX5則波動幅度較大。EBF、PAX5與骨髓pro B、pre B細胞數的相關度再次提示轉錄因子EBF、PAX5對髮育中pro B、pre B細胞數量起主導調控作用。2）E2A、PAX5的蛋白與基因錶達不同步，提示基因錶達對蛋白質閤成隻是具有指導性閤成的作用，還與閤成酶的活性、閤成底物的充足與否等多種因素有關，此外，還可能涉及基因轉錄後調控機製，有待進一步研究證實。3）EBFmRNA在WK0 呈現波動，提示EBF基因的轉錄對運動刺激更為敏感，併髮現EBF比上級調控因子E2A和下遊調控因子PAX5對B細胞髮育的主導調控作用更加關鍵。
목적：관찰운동성면역실형대조공골수조기B세포분화발육적특이성전록인자적영향。방법：SPF급웅성SD대서128지，수궤분위절대안정조（Absolute control，간칭AC조），운동전안정조（Control，간칭A조）、운동후즉각조（Immediate간칭J조）、운동후3 h조（3 Hours，간칭3H조），진행6주체증부하포태운동，분별재제0、2、4、6주말용실시형광정량PCR、Western Blot혹탈개고골면역조화검측기골수중전록인자E2A、EBF、PAX5적단백급기인표체。결과：6주체증부하운동중，재제0주，각조간E2A、EBF、PAX5단백표체균무현저성차이（P〉0.05），이J조적EBF기인표체이정현저성하강（P〈0.05）；제2주，여A조상비，J조E2A、EBF단백표체균현저성하강（P〈0.05），이PAX5단백부3H조정현저성상승（P〈0.05），병차3H조부EBF기인표체구현저성저하（P〈0.05）；제4주，J조EBF단백유비상현저성하강（P〈0.01），3H조유현저성상승（P〈0.05），EBF、PAX5기인표체정현저성하강（P〈0.05）；제6주，PAX5단백재3H조유현저성상승（P〈0.05）。EBF，PAX5여Pro B、Pre B수량백분비지간정교고정성상관계수（EBF단백표체여Pro B、Pre B적상관성분별위0.82、0.89；PAX5단백표체여Pro B、Pre B적상관성분별위0.81、0.87；EBFmRNA여Pro B、Pre B적상관성분별위0.89、0.92）。결론여건의：1）6주체증부하운동과정중，E2A단백수운동적영향，파동폭도교소，EBF、PAX5칙파동폭도교대。EBF、PAX5여골수pro B、pre B세포수적상관도재차제시전록인자EBF、PAX5대발육중pro B、pre B세포수량기주도조공작용。2）E2A、PAX5적단백여기인표체불동보，제시기인표체대단백질합성지시구유지도성합성적작용，환여합성매적활성、합성저물적충족여부등다충인소유관，차외，환가능섭급기인전록후조공궤제，유대진일보연구증실。3）EBFmRNA재WK0 정현파동，제시EBF기인적전록대운동자격경위민감，병발현EBF비상급조공인자E2A화하유조공인자PAX5대B세포발육적주도조공작용경가관건。
Objective：The purpose of this study was to explore the effects of exercise- induced immune imbalance on the transcription factor E2A,EBF,PAX5 of early precursor B lymphocytes development in rat bone marrow.Method：128 Sprague–Dawley rats were randomly assigned to absolute control （AC）,control （A）,immediateness （J） and 3 hours （3H） after exercises,respectively.E2A,EBF,PAX5 protein and gene expression were measured by Real-time fluorescent quantitation PCR,Western Blot or decalcified femur immunohistochemisty at the end of 0 week,2nd,4th and 6th week.Result：WK 0：EBFmRNA at WK 0 J had shown a significant decrease （P〈0.05） compared with A group.WK 2：E2A,EBF protein expression at WK 2 I was significantly decreased （P〈0.05）,and PAX5 only at WK 2 3H was significantly increased （P〈0.05） compared with A group.WK 4：EBF protein expression at WK 4 J showed a very significant decrease （P〈0.01）,EBF mRNA,PAX5 mRNA was significantly decreased （P〈0.05） compared with A group.WK 6：PAX5 protein expression at WK 6 3H was significantly increased （P〈0.05）.EBF,PAX5 and Pro B,Pre B correlation coefficient （EBF ＆ Pro B,r=0.82;EBF ＆ Pre B,r=0.89;PAX5 ＆ Pro B,r=0.81;PAX5 ＆ Pre B,r=0.87;EBFmRNA ＆ Pro B,r=0.89;EBFmRNA ＆ Pre B,r=0.92）.Conclusion：1,EBF,PAX5 were more sensitive to exercise load than E2A.EBF,PAX5 protein and pro B,pre B cell mass in bone marrow to establish the correlation coefficient,once again prompted the transcription factor EBF,PAX5 were the prominent role of the dominant control of the development of pro B,pre B cells;2,EBFmRNA in WK0 showed a significant decrease.It suggests that EBF was even more crucial to the regulation of B cell development than E2A,PAX5.