岭南心血管病杂志
嶺南心血管病雜誌
령남심혈관병잡지
South China Journal of Cardiovascular Diseases
2015年
4期
549-555
,共7页
黄帅%赵明一%富旗%黄成锋%庄建%郑少忆%卢聪%郭惠明%朱平
黃帥%趙明一%富旂%黃成鋒%莊建%鄭少憶%盧聰%郭惠明%硃平
황수%조명일%부기%황성봉%장건%정소억%로총%곽혜명%주평
高压干燥%离体供心保存%冷缺血再灌注损伤%B细胞淋巴瘤/白血病-2%凋亡
高壓榦燥%離體供心保存%冷缺血再灌註損傷%B細胞淋巴瘤/白血病-2%凋亡
고압간조%리체공심보존%랭결혈재관주손상%B세포림파류/백혈병-2%조망
high-pressure mixed gas preservation%isolated heart preservation%cold ischemia and reperfusion injury%B cell lymphoma/leukemia-2%apoptosis
目的 观察氧气(oxygen,O2)及一氧化碳(carbon monoxide,CO)混合高压气体干燥保存方法对小鼠离体供心冷缺血再灌注损伤的影响.方法 采用C57BL/6雄性小鼠,建立同系小鼠心脏颈部异位移植模型.4～6周龄供体鼠48只,数字表法随机分为4组(n=12):空白对照组(A组)、即刻移植组(B组)、组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐(histidine-tryptophan-ketoglutarate solution,HTK)液保存组(C组)及高压干燥保存组(D组).6～8周龄小鼠36只,数字表法随机分为3组,即刻移植受体组、HTK受体组及高压干燥受体组(n=12).供心处理如下:A组仅取供体心,不做移植;B组供心不经保存取下后即刻移植;C组供心浸泡于HTK液中;D组供心悬挂并置于高压气体罐中(PO2:3.2× 101.3 kPa+PCO:0.8× 101.3 kPa=4×101.3 kPa).C、D两组供心均于4℃冰箱中保存24 h后,分别移植于受体组小鼠颈部.移植后2h,对比观察B、C、D三组复跳情况及供心功能.移植后24 h,检测受体鼠血清心功酶变化;取各组供心组织,分别采用苏木素-伊红(HE)染色、Tunnel染色及行蛋白免疫印迹(Western-blot,WB)检测,对比观察供心病理学改变、心肌细胞凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-2 (B cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2)蛋白表达情况.结果 B组10只供心复跳,C组2只供心复跳,D组9只供心复跳,3组间复跳率比较,差异有统计学意义[83.3％(10/12)vs.16.7％(2/12)vs.75.0％(9/12),P=0.0015];其中D组复跳率低于B组,但明显高于C组,差异有统计学意义(P＜0.0125).移植2h后B、C、D组间供心功能评分比较,差异有统计学意义(5vs.0 vs.3,P＜0.01),两两比较差异有统计学意义(P＜0.05).4组间血清肌钙蛋白Ⅰ (troponin Ⅰ,TnⅠ)浓度比较,差异有统计学意义(P＜0.001),D组高于A、B两组,但低于C组(P＜0.001).苏木素伊红染色结果显示D组细胞水肿、炎症细胞浸润等组织变化情况较A、B两组明显,但较C组轻.Tunnel染色结果显示D组心肌细胞凋亡较A、B两组明显,但少于C组,差异有统计学意义(P＜0.01).Western-blot结果显示D组bcl-2的表达上调,高于其余3组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 高压干燥保存可减轻离体供心冷缺血再灌注损伤,维持供心活力,有效延长供心保存时间.
目的 觀察氧氣(oxygen,O2)及一氧化碳(carbon monoxide,CO)混閤高壓氣體榦燥保存方法對小鼠離體供心冷缺血再灌註損傷的影響.方法 採用C57BL/6雄性小鼠,建立同繫小鼠心髒頸部異位移植模型.4～6週齡供體鼠48隻,數字錶法隨機分為4組(n=12):空白對照組(A組)、即刻移植組(B組)、組氨痠-色氨痠-酮戊二痠鹽(histidine-tryptophan-ketoglutarate solution,HTK)液保存組(C組)及高壓榦燥保存組(D組).6～8週齡小鼠36隻,數字錶法隨機分為3組,即刻移植受體組、HTK受體組及高壓榦燥受體組(n=12).供心處理如下:A組僅取供體心,不做移植;B組供心不經保存取下後即刻移植;C組供心浸泡于HTK液中;D組供心懸掛併置于高壓氣體罐中(PO2:3.2× 101.3 kPa+PCO:0.8× 101.3 kPa=4×101.3 kPa).C、D兩組供心均于4℃冰箱中保存24 h後,分彆移植于受體組小鼠頸部.移植後2h,對比觀察B、C、D三組複跳情況及供心功能.移植後24 h,檢測受體鼠血清心功酶變化;取各組供心組織,分彆採用囌木素-伊紅(HE)染色、Tunnel染色及行蛋白免疫印跡(Western-blot,WB)檢測,對比觀察供心病理學改變、心肌細胞凋亡及B細胞淋巴瘤/白血病-2 (B cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2)蛋白錶達情況.結果 B組10隻供心複跳,C組2隻供心複跳,D組9隻供心複跳,3組間複跳率比較,差異有統計學意義[83.3％(10/12)vs.16.7％(2/12)vs.75.0％(9/12),P=0.0015];其中D組複跳率低于B組,但明顯高于C組,差異有統計學意義(P＜0.0125).移植2h後B、C、D組間供心功能評分比較,差異有統計學意義(5vs.0 vs.3,P＜0.01),兩兩比較差異有統計學意義(P＜0.05).4組間血清肌鈣蛋白Ⅰ (troponin Ⅰ,TnⅠ)濃度比較,差異有統計學意義(P＜0.001),D組高于A、B兩組,但低于C組(P＜0.001).囌木素伊紅染色結果顯示D組細胞水腫、炎癥細胞浸潤等組織變化情況較A、B兩組明顯,但較C組輕.Tunnel染色結果顯示D組心肌細胞凋亡較A、B兩組明顯,但少于C組,差異有統計學意義(P＜0.01).Western-blot結果顯示D組bcl-2的錶達上調,高于其餘3組,差異有統計學意義(P＜0.05).結論 高壓榦燥保存可減輕離體供心冷缺血再灌註損傷,維持供心活力,有效延長供心保存時間.
목적 관찰양기(oxygen,O2)급일양화탄(carbon monoxide,CO)혼합고압기체간조보존방법대소서리체공심랭결혈재관주손상적영향.방법 채용C57BL/6웅성소서,건립동계소서심장경부이위이식모형.4～6주령공체서48지,수자표법수궤분위4조(n=12):공백대조조(A조)、즉각이식조(B조)、조안산-색안산-동무이산염(histidine-tryptophan-ketoglutarate solution,HTK)액보존조(C조)급고압간조보존조(D조).6～8주령소서36지,수자표법수궤분위3조,즉각이식수체조、HTK수체조급고압간조수체조(n=12).공심처리여하:A조부취공체심,불주이식;B조공심불경보존취하후즉각이식;C조공심침포우HTK액중;D조공심현괘병치우고압기체관중(PO2:3.2× 101.3 kPa+PCO:0.8× 101.3 kPa=4×101.3 kPa).C、D량조공심균우4℃빙상중보존24 h후,분별이식우수체조소서경부.이식후2h,대비관찰B、C、D삼조복도정황급공심공능.이식후24 h,검측수체서혈청심공매변화;취각조공심조직,분별채용소목소-이홍(HE)염색、Tunnel염색급행단백면역인적(Western-blot,WB)검측,대비관찰공심병이학개변、심기세포조망급B세포림파류/백혈병-2 (B cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2)단백표체정황.결과 B조10지공심복도,C조2지공심복도,D조9지공심복도,3조간복도솔비교,차이유통계학의의[83.3％(10/12)vs.16.7％(2/12)vs.75.0％(9/12),P=0.0015];기중D조복도솔저우B조,단명현고우C조,차이유통계학의의(P＜0.0125).이식2h후B、C、D조간공심공능평분비교,차이유통계학의의(5vs.0 vs.3,P＜0.01),량량비교차이유통계학의의(P＜0.05).4조간혈청기개단백Ⅰ (troponin Ⅰ,TnⅠ)농도비교,차이유통계학의의(P＜0.001),D조고우A、B량조,단저우C조(P＜0.001).소목소이홍염색결과현시D조세포수종、염증세포침윤등조직변화정황교A、B량조명현,단교C조경.Tunnel염색결과현시D조심기세포조망교A、B량조명현,단소우C조,차이유통계학의의(P＜0.01).Western-blot결과현시D조bcl-2적표체상조,고우기여3조,차이유통계학의의(P＜0.05).결론 고압간조보존가감경리체공심랭결혈재관주손상,유지공심활력,유효연장공심보존시간.
