中国神经免疫学和神经病学杂志
中國神經免疫學和神經病學雜誌
중국신경면역학화신경병학잡지
Chinese Journal of Neuroimmunology and Neurology
2015年
4期
269-272
,共4页
杨海玉%吴晓牧%刘勇%曾玉娥
楊海玉%吳曉牧%劉勇%曾玉娥
양해옥%오효목%류용%증옥아
骨髓间充质干细胞%海马神经元%原代培养%凋亡%酒精性痴呆
骨髓間充質榦細胞%海馬神經元%原代培養%凋亡%酒精性癡呆
골수간충질간세포%해마신경원%원대배양%조망%주정성치태
bone marrow mesenchymal stem cell%hippocampal neuron%primary culture%apoptosis%alcohol-associated dementia
目的 通过体外观察骨髓间充质干细胞(BMMSC)对酒精诱导海马神经元损伤的作用,初步探讨BMMSC治疗酒精性痴呆(AAD)的可行性.方法 取胎鼠海马进行原代神经元培养并进行神经元纯度鉴定.酒精组给予100 mol/L酒精37℃培养24h,建立酒精诱导海马神经元损伤模型;BMMSC+酒精组在其培养液中同时加入BMMSC条件培养液(终浓度为50％)及100 mol/L酒精,37℃培养24 h;另设相同浓度的BMMSC条件培养液对照组(BMMSC组)及空白对照组(对照组).采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞存活率,以碘化丙啶(PI)/Hoechst33342染色观察细胞形态及凋亡情况.结果 原代培养的海马神经元高表达神经元特异性烯醇化酶(NSE),低表达神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP),提示成功培养了纯度较高的原代海马神经元.酒精组细胞存活率(0.80±0.09)低于对照组(1.00±0.11;t=4.128,P＜0.01)及BMMSC组(1.04±0.07;t=-6.052,P＜0.01);BMMSC+酒精组细胞存活率(0.92±0.11)高于酒精组(t=2.555,P＜0.05).BMMSC组及BMMSC+酒精组细胞存活率与对照组比较差异无统计学意义(均P＞0.05).酒精组可见较多的细胞核呈致密浓染及核碎裂的凋亡细胞,BMMSC+酒精组的凋亡细胞数量明显减少.结论 BMMSC可抑制酒精诱导的海马神经元凋亡发生,提示BMMSC移植治疗AAD可能具有一定可行性.
目的 通過體外觀察骨髓間充質榦細胞(BMMSC)對酒精誘導海馬神經元損傷的作用,初步探討BMMSC治療酒精性癡呆(AAD)的可行性.方法 取胎鼠海馬進行原代神經元培養併進行神經元純度鑒定.酒精組給予100 mol/L酒精37℃培養24h,建立酒精誘導海馬神經元損傷模型;BMMSC+酒精組在其培養液中同時加入BMMSC條件培養液(終濃度為50％)及100 mol/L酒精,37℃培養24 h;另設相同濃度的BMMSC條件培養液對照組(BMMSC組)及空白對照組(對照組).採用四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法檢測各組細胞存活率,以碘化丙啶(PI)/Hoechst33342染色觀察細胞形態及凋亡情況.結果 原代培養的海馬神經元高錶達神經元特異性烯醇化酶(NSE),低錶達神經膠質纖維痠性蛋白(GFAP),提示成功培養瞭純度較高的原代海馬神經元.酒精組細胞存活率(0.80±0.09)低于對照組(1.00±0.11;t=4.128,P＜0.01)及BMMSC組(1.04±0.07;t=-6.052,P＜0.01);BMMSC+酒精組細胞存活率(0.92±0.11)高于酒精組(t=2.555,P＜0.05).BMMSC組及BMMSC+酒精組細胞存活率與對照組比較差異無統計學意義(均P＞0.05).酒精組可見較多的細胞覈呈緻密濃染及覈碎裂的凋亡細胞,BMMSC+酒精組的凋亡細胞數量明顯減少.結論 BMMSC可抑製酒精誘導的海馬神經元凋亡髮生,提示BMMSC移植治療AAD可能具有一定可行性.
목적 통과체외관찰골수간충질간세포(BMMSC)대주정유도해마신경원손상적작용,초보탐토BMMSC치료주정성치태(AAD)적가행성.방법 취태서해마진행원대신경원배양병진행신경원순도감정.주정조급여100 mol/L주정37℃배양24h,건립주정유도해마신경원손상모형;BMMSC+주정조재기배양액중동시가입BMMSC조건배양액(종농도위50％)급100 mol/L주정,37℃배양24 h;령설상동농도적BMMSC조건배양액대조조(BMMSC조)급공백대조조(대조조).채용사갑기우담서람(MTT)비색법검측각조세포존활솔,이전화병정(PI)/Hoechst33342염색관찰세포형태급조망정황.결과 원대배양적해마신경원고표체신경원특이성희순화매(NSE),저표체신경효질섬유산성단백(GFAP),제시성공배양료순도교고적원대해마신경원.주정조세포존활솔(0.80±0.09)저우대조조(1.00±0.11;t=4.128,P＜0.01)급BMMSC조(1.04±0.07;t=-6.052,P＜0.01);BMMSC+주정조세포존활솔(0.92±0.11)고우주정조(t=2.555,P＜0.05).BMMSC조급BMMSC+주정조세포존활솔여대조조비교차이무통계학의의(균P＞0.05).주정조가견교다적세포핵정치밀농염급핵쇄렬적조망세포,BMMSC+주정조적조망세포수량명현감소.결론 BMMSC가억제주정유도적해마신경원조망발생,제시BMMSC이식치료AAD가능구유일정가행성.
