中国神经免疫学和神经病学杂志
中國神經免疫學和神經病學雜誌
중국신경면역학화신경병학잡지
Chinese Journal of Neuroimmunology and Neurology
2015年
4期
263-268
,共6页
邓江山%赵飞%俞晓燕%赵玉武
鄧江山%趙飛%俞曉燕%趙玉武
산강산%조비%유효연%조옥무
水通道蛋白4%低血糖%星形胶质细胞%脑水肿
水通道蛋白4%低血糖%星形膠質細胞%腦水腫
수통도단백4%저혈당%성형효질세포%뇌수종
aquaporin 4%hypoglycemia%astrocyte%brain edema
目的 探讨低糖体外培养对大鼠原代星形胶质细胞水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)表达量及分布的影响.方法 对体外培养的原代大鼠星形胶质细胞进行0 mmol/L(无糖)和1 mmol/L葡萄糖低糖培养,以5.5 mmol/L葡萄糖作为正常糖浓度对照进行如下实验:(1)采用活细胞成像技术检测无糖培养后的星形胶质细胞的体积变化;(2)以Western blot检测无糖培养0h、3h、6h、12h和24 h,以及0 mmol/L、1 mmol/L和5.5mmol/L葡萄糖培养24 h后星形胶质细胞的AQP4表达量;(3)以免疫荧光染色检测0 mmol/L、1 mmol/L和5.5 mmol/L葡萄糖培养6h后AQP4在星形胶质细胞上的分布.结果 (1)与0 min时比较,无糖培养15 min(1.14±0.03)和30 min时(1.15±0.02)星形胶质细胞相对体积均明显增大(P＜0.01).(2)无糖0 mmol/L(含血清)培养实验中,与0 h(AQP4相对表达量为1)比较,12 h(1.55±0.21)、24 h时(1.67±0.16) AQP4相对表达量均明显增加(P＜0.01);0 mmol/L、1 mmol/L和5.5 mmol/L葡萄糖(含血清)培养24 h后,与5.5 mmol/L组(AQP4相对表达量为1)比较,0 mmol/L组AQP4相对表达量(3.23±0.23)明显增加(P＜0.01).(3)与0h时(AQP4相对表达量为1)比较,无糖(无血清)培养6h后AQP4蛋白相对表达量(1.32±0.09)明显上调(P＜0.05),24 h时相对表达量(0.80±0.05)下降(P＜0.05);0 mmol/L、1 mmol/L和5.5 mmol/L葡萄糖(无血清)培养24 h后,与5.5 mmol/L(AQP4相对表达量为1)组比较,0 mmol/L组AQP4相对表达量(0.75±0.07)明显降低(P＜0.05).无论含或不含血清,与5.5 mmol/L葡萄糖组比较,0 mmol/L和1 mmol/L组AQP4在星形胶质细胞向膜上集中特异性分布更加明显.结论 低糖处理可引起星形胶质细胞水肿,AQP4蛋白表达量发生变化和向细胞膜上集中分布.AQP4在低血糖性脑水肿中可能发挥重要作用.
目的 探討低糖體外培養對大鼠原代星形膠質細胞水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)錶達量及分佈的影響.方法 對體外培養的原代大鼠星形膠質細胞進行0 mmol/L(無糖)和1 mmol/L葡萄糖低糖培養,以5.5 mmol/L葡萄糖作為正常糖濃度對照進行如下實驗:(1)採用活細胞成像技術檢測無糖培養後的星形膠質細胞的體積變化;(2)以Western blot檢測無糖培養0h、3h、6h、12h和24 h,以及0 mmol/L、1 mmol/L和5.5mmol/L葡萄糖培養24 h後星形膠質細胞的AQP4錶達量;(3)以免疫熒光染色檢測0 mmol/L、1 mmol/L和5.5 mmol/L葡萄糖培養6h後AQP4在星形膠質細胞上的分佈.結果 (1)與0 min時比較,無糖培養15 min(1.14±0.03)和30 min時(1.15±0.02)星形膠質細胞相對體積均明顯增大(P＜0.01).(2)無糖0 mmol/L(含血清)培養實驗中,與0 h(AQP4相對錶達量為1)比較,12 h(1.55±0.21)、24 h時(1.67±0.16) AQP4相對錶達量均明顯增加(P＜0.01);0 mmol/L、1 mmol/L和5.5 mmol/L葡萄糖(含血清)培養24 h後,與5.5 mmol/L組(AQP4相對錶達量為1)比較,0 mmol/L組AQP4相對錶達量(3.23±0.23)明顯增加(P＜0.01).(3)與0h時(AQP4相對錶達量為1)比較,無糖(無血清)培養6h後AQP4蛋白相對錶達量(1.32±0.09)明顯上調(P＜0.05),24 h時相對錶達量(0.80±0.05)下降(P＜0.05);0 mmol/L、1 mmol/L和5.5 mmol/L葡萄糖(無血清)培養24 h後,與5.5 mmol/L(AQP4相對錶達量為1)組比較,0 mmol/L組AQP4相對錶達量(0.75±0.07)明顯降低(P＜0.05).無論含或不含血清,與5.5 mmol/L葡萄糖組比較,0 mmol/L和1 mmol/L組AQP4在星形膠質細胞嚮膜上集中特異性分佈更加明顯.結論 低糖處理可引起星形膠質細胞水腫,AQP4蛋白錶達量髮生變化和嚮細胞膜上集中分佈.AQP4在低血糖性腦水腫中可能髮揮重要作用.
목적 탐토저당체외배양대대서원대성형효질세포수통도단백4(aquaporin 4,AQP4)표체량급분포적영향.방법 대체외배양적원대대서성형효질세포진행0 mmol/L(무당)화1 mmol/L포도당저당배양,이5.5 mmol/L포도당작위정상당농도대조진행여하실험:(1)채용활세포성상기술검측무당배양후적성형효질세포적체적변화;(2)이Western blot검측무당배양0h、3h、6h、12h화24 h,이급0 mmol/L、1 mmol/L화5.5mmol/L포도당배양24 h후성형효질세포적AQP4표체량;(3)이면역형광염색검측0 mmol/L、1 mmol/L화5.5 mmol/L포도당배양6h후AQP4재성형효질세포상적분포.결과 (1)여0 min시비교,무당배양15 min(1.14±0.03)화30 min시(1.15±0.02)성형효질세포상대체적균명현증대(P＜0.01).(2)무당0 mmol/L(함혈청)배양실험중,여0 h(AQP4상대표체량위1)비교,12 h(1.55±0.21)、24 h시(1.67±0.16) AQP4상대표체량균명현증가(P＜0.01);0 mmol/L、1 mmol/L화5.5 mmol/L포도당(함혈청)배양24 h후,여5.5 mmol/L조(AQP4상대표체량위1)비교,0 mmol/L조AQP4상대표체량(3.23±0.23)명현증가(P＜0.01).(3)여0h시(AQP4상대표체량위1)비교,무당(무혈청)배양6h후AQP4단백상대표체량(1.32±0.09)명현상조(P＜0.05),24 h시상대표체량(0.80±0.05)하강(P＜0.05);0 mmol/L、1 mmol/L화5.5 mmol/L포도당(무혈청)배양24 h후,여5.5 mmol/L(AQP4상대표체량위1)조비교,0 mmol/L조AQP4상대표체량(0.75±0.07)명현강저(P＜0.05).무론함혹불함혈청,여5.5 mmol/L포도당조비교,0 mmol/L화1 mmol/L조AQP4재성형효질세포향막상집중특이성분포경가명현.결론 저당처리가인기성형효질세포수종,AQP4단백표체량발생변화화향세포막상집중분포.AQP4재저혈당성뇌수종중가능발휘중요작용.
