CAJ | 학술논문

目的本研究拟初步探讨肝爽颗粒通过细胞自噬在保护四氯化碳(CCl4)诱导小鼠慢性肝损伤模型和肝损伤细胞模型中的作用和机制,为其临床应用提供依据.方法 CCl4腹腔注射构建小鼠慢性肝损伤模型,CCl4体外诱导肝细胞系7702细胞构建肝损伤细胞模型.建模成功后给予肝爽颗粒进行干预,同时设立正常对照组和未给予肝爽颗粒的CCl4组.在此基础上,应用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制细胞自噬并观察肝爽颗粒对细胞凋亡的影响.HE染色观察肝组织损伤情况;生化法测定血清ALT、AST水平;免疫荧光染色法、Western Blot观察细胞自噬情况;流式细胞术及AnnexinV/PI双标记免疫荧光染色法检测肝细胞凋亡情况.多组间比较采用方差分析,方差齐采用LSD检验,方差不齐采用Dunnett T3检验.结果 HE染色显示肝爽颗粒干预组小鼠肝组织损伤程度较CCl4组明显减轻,3组间ALT和AST总体表达水平差异有统计学意义(F值分别为15.76、13.35,P值均＜0.05);体内细胞实验和体外动物实验免疫荧光结果均显示肝爽颗粒干预组细胞自噬表达较CCl4组明显增加,肝细胞凋亡较CCl4组明显减少.加入3-MA后肝爽颗粒的保护性作用减弱,细胞凋亡增加.流式细胞仪检测结果显示5组7702细胞凋亡比例差异有统计学意义(F=25.637,P＜0.01).结论肝爽颗粒对肝脏损伤具有保护性作用,其抗凋亡机制可能与肝爽颗粒增强细胞自噬有关.
목적 본연구의초보탐토간상과립통과세포자서재보호사록화탄(CCl4)유도소서만성간손상모형화간손상세포모형중적작용화궤제,위기림상응용제공의거.방법 CCl4복강주사구건소서만성간손상모형,CCl4체외유도간세포계7702세포구건간손상세포모형.건모성공후급여간상과립진행간예,동시설립정상대조조화미급여간상과립적CCl4조.재차기출상,응용자서억제제3-갑기선표령(3-MA)억제세포자서병관찰간상과립대세포조망적영향.HE염색관찰간조직손상정황;생화법측정혈청ALT、AST수평;면역형광염색법、Western Blot관찰세포자서정황;류식세포술급AnnexinV/PI쌍표기면역형광염색법검측간세포조망정황.다조간비교채용방차분석,방차제채용LSD검험,방차불제채용Dunnett T3검험.결과 HE염색현시간상과립간예조소서간조직손상정도교CCl4조명현감경,3조간ALT화AST총체표체수평차이유통계학의의(F치분별위15.76、13.35,P치균＜0.05);체내세포실험화체외동물실험면역형광결과균현시간상과립간예조세포자서표체교CCl4조명현증가,간세포조망교CCl4조명현감소.가입3-MA후간상과립적보호성작용감약,세포조망증가.류식세포의검측결과현시5조7702세포조망비례차이유통계학의의(F=25.637,P＜0.01).결론 간상과립대간장손상구유보호성작용,기항조망궤제가능여간상과립증강세포자서유관.