湖北农业科学
湖北農業科學
호북농업과학
Hubei Agricultural Sciences
2015年
11期
2767-2772
,共6页
江翱%吴辉%袁梦思%孙文秀
江翱%吳輝%袁夢思%孫文秀
강고%오휘%원몽사%손문수
烟草(Nicotiana tabacum)%多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白质(PGIPs)基因%枯草芽孢杆菌%表达
煙草(Nicotiana tabacum)%多聚半乳糖醛痠酶抑製蛋白質(PGIPs)基因%枯草芽孢桿菌%錶達
연초(Nicotiana tabacum)%다취반유당철산매억제단백질(PGIPs)기인%고초아포간균%표체
tobacco(Nicotiana tabacum)%polygalacturonase-inhibiting proteins(PGIPs)gene%Bacillus subtilis%recombinant expression
根据GenBank数据库报道的林烟草(Nicotiana sylvestris)PGIP基因cDNA序列,设计特异性引物,从普通烟草(Nicotiana tabacum)种植品种小黄金中分离得到了其gDNA序列,分析结果发现烟草PGIP基因没有内含子序列.信号肽分析结果表明,烟草PGIP基因含有一段长28个氨基酸的信号肽.将去除信号肽的烟草PGIP基因片段亚克隆至枯草芽孢杆菌表达载体pHT43中,转化枯草芽孢杆菌菌株WB600并进行IPTG诱导.SDS-PAGE电泳表明,重组菌株可成功表达目的蛋白质,分子质量符合预期大小;琼脂扩散试验结果发现,表达的烟草PGIP蛋白质能够明显抑制辣椒疫霉PGs的活性.
根據GenBank數據庫報道的林煙草(Nicotiana sylvestris)PGIP基因cDNA序列,設計特異性引物,從普通煙草(Nicotiana tabacum)種植品種小黃金中分離得到瞭其gDNA序列,分析結果髮現煙草PGIP基因沒有內含子序列.信號肽分析結果錶明,煙草PGIP基因含有一段長28箇氨基痠的信號肽.將去除信號肽的煙草PGIP基因片段亞剋隆至枯草芽孢桿菌錶達載體pHT43中,轉化枯草芽孢桿菌菌株WB600併進行IPTG誘導.SDS-PAGE電泳錶明,重組菌株可成功錶達目的蛋白質,分子質量符閤預期大小;瓊脂擴散試驗結果髮現,錶達的煙草PGIP蛋白質能夠明顯抑製辣椒疫黴PGs的活性.
근거GenBank수거고보도적림연초(Nicotiana sylvestris)PGIP기인cDNA서렬,설계특이성인물,종보통연초(Nicotiana tabacum)충식품충소황금중분리득도료기gDNA서렬,분석결과발현연초PGIP기인몰유내함자서렬.신호태분석결과표명,연초PGIP기인함유일단장28개안기산적신호태.장거제신호태적연초PGIP기인편단아극륭지고초아포간균표체재체pHT43중,전화고초아포간균균주WB600병진행IPTG유도.SDS-PAGE전영표명,중조균주가성공표체목적단백질,분자질량부합예기대소;경지확산시험결과발현,표체적연초PGIP단백질능구명현억제랄초역매PGs적활성.