癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
Carcinogenesis,Teratogenesis & Mutagenesis
2015年
4期
304-308
,共5页
文海若%淡墨%齐乃松%耿兴超%王雪
文海若%淡墨%齊迺鬆%耿興超%王雪
문해약%담묵%제내송%경흥초%왕설
胞质分裂阻滞%微核%微核细胞组学%犬肾小管上皮细胞系%雷公藤甲索%甘草酸二铵
胞質分裂阻滯%微覈%微覈細胞組學%犬腎小管上皮細胞繫%雷公籐甲索%甘草痠二銨
포질분렬조체%미핵%미핵세포조학%견신소관상피세포계%뢰공등갑색%감초산이안
cytokinesis-block micronucleus assay%micronucleus cytomic%MDCK%triptolide%diammonium glycyrrhizinate
目的:采用不同组织来源的细胞系建立微核细胞组学,比较其遗传毒性生物标志物的敏感性,并研究雷公藤甲素(TPL)和甘草酸二铵(DG)对大鼠成纤维肺细胞(CHL)和犬肾小管上皮细胞系(MDCK)细胞微核率的影响.方法:首先建立方法,采用不同浓度丝裂霉素C(MMC)与CHL、L02、MDCK、Bhas42细胞作用6h后给予细胞松弛素B(CytoB)继续培养约1.5个细胞倍增时间.收获细胞、制片、染色及镜检.计算每个剂量胞质分裂增殖指数(CBPI)、复制指数(RI)、坏死(Nec)及凋亡(Apop)细胞的千分率、双核细胞中微核(MN)、核芽(NBUD)和核质桥(NPB)出现的千分率.然后进行方法的验证,采用CHL细胞经不同浓度(1、10和100 μg/mL)DG预处理24h后观察DG对上述细胞毒性和微核细胞组相关指标的影响.为进一步了解微核细胞组学对遗传毒性靶器官评估的效果,MDCK细胞经DG(10 μg/mL)预处理24 h后采用不同浓度(1和5 μg/mL)TPL染毒1h,观察其对遗传毒性的影响.结果:MMC诱发的不同细胞系细胞毒性(CBPI、RI、Apop与Nec)均随MMC浓度升高呈升高趋势.各组细胞的MN、NBUD和NPB均出现不同程度的剂量相关性升高,但不同细胞系对MMC诱发的生物标志物峰值出现的敏感度不同.在验证实验中,与对照组相比,DG(10和100μg/mL)对MMC(0.2 μg/mL)诱发的MN、NBUD和NPB升高有显著的抑制作用(P均＜0.05).TPL可诱发MDCK细胞NBUD和MN显著上升(P＜0.05),且DG预处理可有效拮抗该效应(P＜0.05).结论:多细胞系胞质分裂阻滞微核细胞组学实验法可同时对多项遗传毒性指标进行评价.DG对CHL及MDCK细胞产生的染色体断裂有保护作用,在临床配伍中可发挥抗细胞DNA损伤的功效.
目的:採用不同組織來源的細胞繫建立微覈細胞組學,比較其遺傳毒性生物標誌物的敏感性,併研究雷公籐甲素(TPL)和甘草痠二銨(DG)對大鼠成纖維肺細胞(CHL)和犬腎小管上皮細胞繫(MDCK)細胞微覈率的影響.方法:首先建立方法,採用不同濃度絲裂黴素C(MMC)與CHL、L02、MDCK、Bhas42細胞作用6h後給予細胞鬆弛素B(CytoB)繼續培養約1.5箇細胞倍增時間.收穫細胞、製片、染色及鏡檢.計算每箇劑量胞質分裂增殖指數(CBPI)、複製指數(RI)、壞死(Nec)及凋亡(Apop)細胞的韆分率、雙覈細胞中微覈(MN)、覈芽(NBUD)和覈質橋(NPB)齣現的韆分率.然後進行方法的驗證,採用CHL細胞經不同濃度(1、10和100 μg/mL)DG預處理24h後觀察DG對上述細胞毒性和微覈細胞組相關指標的影響.為進一步瞭解微覈細胞組學對遺傳毒性靶器官評估的效果,MDCK細胞經DG(10 μg/mL)預處理24 h後採用不同濃度(1和5 μg/mL)TPL染毒1h,觀察其對遺傳毒性的影響.結果:MMC誘髮的不同細胞繫細胞毒性(CBPI、RI、Apop與Nec)均隨MMC濃度升高呈升高趨勢.各組細胞的MN、NBUD和NPB均齣現不同程度的劑量相關性升高,但不同細胞繫對MMC誘髮的生物標誌物峰值齣現的敏感度不同.在驗證實驗中,與對照組相比,DG(10和100μg/mL)對MMC(0.2 μg/mL)誘髮的MN、NBUD和NPB升高有顯著的抑製作用(P均＜0.05).TPL可誘髮MDCK細胞NBUD和MN顯著上升(P＜0.05),且DG預處理可有效拮抗該效應(P＜0.05).結論:多細胞繫胞質分裂阻滯微覈細胞組學實驗法可同時對多項遺傳毒性指標進行評價.DG對CHL及MDCK細胞產生的染色體斷裂有保護作用,在臨床配伍中可髮揮抗細胞DNA損傷的功效.
목적:채용불동조직래원적세포계건립미핵세포조학,비교기유전독성생물표지물적민감성,병연구뢰공등갑소(TPL)화감초산이안(DG)대대서성섬유폐세포(CHL)화견신소관상피세포계(MDCK)세포미핵솔적영향.방법:수선건립방법,채용불동농도사렬매소C(MMC)여CHL、L02、MDCK、Bhas42세포작용6h후급여세포송이소B(CytoB)계속배양약1.5개세포배증시간.수획세포、제편、염색급경검.계산매개제량포질분렬증식지수(CBPI)、복제지수(RI)、배사(Nec)급조망(Apop)세포적천분솔、쌍핵세포중미핵(MN)、핵아(NBUD)화핵질교(NPB)출현적천분솔.연후진행방법적험증,채용CHL세포경불동농도(1、10화100 μg/mL)DG예처리24h후관찰DG대상술세포독성화미핵세포조상관지표적영향.위진일보료해미핵세포조학대유전독성파기관평고적효과,MDCK세포경DG(10 μg/mL)예처리24 h후채용불동농도(1화5 μg/mL)TPL염독1h,관찰기대유전독성적영향.결과:MMC유발적불동세포계세포독성(CBPI、RI、Apop여Nec)균수MMC농도승고정승고추세.각조세포적MN、NBUD화NPB균출현불동정도적제량상관성승고,단불동세포계대MMC유발적생물표지물봉치출현적민감도불동.재험증실험중,여대조조상비,DG(10화100μg/mL)대MMC(0.2 μg/mL)유발적MN、NBUD화NPB승고유현저적억제작용(P균＜0.05).TPL가유발MDCK세포NBUD화MN현저상승(P＜0.05),차DG예처리가유효길항해효응(P＜0.05).결론:다세포계포질분렬조체미핵세포조학실험법가동시대다항유전독성지표진행평개.DG대CHL급MDCK세포산생적염색체단렬유보호작용,재림상배오중가발휘항세포DNA손상적공효.
