赣南医学院学报
贛南醫學院學報
공남의학원학보
Journal of Gannan Medical University
2015年
3期
335-339,375
,共6页
钟一鸣%钟华平%李法权%曾石秀%廖伟
鐘一鳴%鐘華平%李法權%曾石秀%廖偉
종일명%종화평%리법권%증석수%료위
FKHRL1%pcDNA3.1(-)%血管平滑肌细胞
FKHRL1%pcDNA3.1(-)%血管平滑肌細胞
FKHRL1%pcDNA3.1(-)%혈관평활기세포
目的:观察FKHRL1三倍突变体(FKHRL1-TM)对球囊损伤后培养的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响.方法:以VSMCs总RNA为模板,RT-PCR法扩增FKHRL1基因全长编码序列,克隆入载体pcDNA3.1后,通过基因定点突变试剂盒对FKHRL1基因三个位点进行点突变,获得重组质粒pcDNA3.1-FKHRL1-TM,然后将该重组质粒转染VSMCs细胞,RT-PCR法检测FKHRL1-TM基因在该细胞中的表达变化,并通过MTT、流式实验,检测其对VSMCs增殖的影响.结果:成功构建了重组质粒pcDNA3.1-FKHRL1-TM.重组质粒转染组FKHRL1基因表达量明显多于未转染组.MTT、流式实验结果表明,表达的FKHRL1可抑制平滑肌细胞的增殖(P＜0.05).结论:FKHRL1转录囚子在平滑肌细胞中表达增加和转录活性增强后,可以抑制平滑肌细胞的过度增殖.
目的:觀察FKHRL1三倍突變體(FKHRL1-TM)對毬囊損傷後培養的血管平滑肌細胞(VSMCs)增殖的影響.方法:以VSMCs總RNA為模闆,RT-PCR法擴增FKHRL1基因全長編碼序列,剋隆入載體pcDNA3.1後,通過基因定點突變試劑盒對FKHRL1基因三箇位點進行點突變,穫得重組質粒pcDNA3.1-FKHRL1-TM,然後將該重組質粒轉染VSMCs細胞,RT-PCR法檢測FKHRL1-TM基因在該細胞中的錶達變化,併通過MTT、流式實驗,檢測其對VSMCs增殖的影響.結果:成功構建瞭重組質粒pcDNA3.1-FKHRL1-TM.重組質粒轉染組FKHRL1基因錶達量明顯多于未轉染組.MTT、流式實驗結果錶明,錶達的FKHRL1可抑製平滑肌細胞的增殖(P＜0.05).結論:FKHRL1轉錄囚子在平滑肌細胞中錶達增加和轉錄活性增彊後,可以抑製平滑肌細胞的過度增殖.
목적:관찰FKHRL1삼배돌변체(FKHRL1-TM)대구낭손상후배양적혈관평활기세포(VSMCs)증식적영향.방법:이VSMCs총RNA위모판,RT-PCR법확증FKHRL1기인전장편마서렬,극륭입재체pcDNA3.1후,통과기인정점돌변시제합대FKHRL1기인삼개위점진행점돌변,획득중조질립pcDNA3.1-FKHRL1-TM,연후장해중조질립전염VSMCs세포,RT-PCR법검측FKHRL1-TM기인재해세포중적표체변화,병통과MTT、류식실험,검측기대VSMCs증식적영향.결과:성공구건료중조질립pcDNA3.1-FKHRL1-TM.중조질립전염조FKHRL1기인표체량명현다우미전염조.MTT、류식실험결과표명,표체적FKHRL1가억제평활기세포적증식(P＜0.05).결론:FKHRL1전록수자재평활기세포중표체증가화전록활성증강후,가이억제평활기세포적과도증식.
