华北农学报
華北農學報
화북농학보
Acta Agriculturae Boreali-Sinica
2015年
4期
13-20
,共8页
沙伟%张梅娟%刘博%徐红红
沙偉%張梅娟%劉博%徐紅紅
사위%장매연%류박%서홍홍
东亚砂藓%bZIP 转录因子%RjbZIP 基因%基因克隆%表达分析
東亞砂蘚%bZIP 轉錄因子%RjbZIP 基因%基因剋隆%錶達分析
동아사선%bZIP 전록인자%RjbZIP 기인%기인극륭%표체분석
Racomitrium japonicum%bZIP transcription factor%RjbZIP gene%Gene cloning%Expression analysis
为研究 bZIP 转录因子在苔藓植物中的生物学功能,以东亚砂藓转录组测序获得的一个与 bZIP 转录因子同源性较高的基因片段为基础,采用 RT-PCR 技术克隆得到该基因的 cDNA 全长序列,命名为 RjbZIP。该基因 cDNA 全长为1477 bp,包含1个1422 bp 的开放阅读框,编码473个氨基酸,预测蛋白分子量为5.114 kDa,等电点为6.97。RjbZIP 蛋白属于不稳定蛋白,无跨膜区和信号肽结构,亚细胞定位于细胞核。该蛋白含有典型的 bZIP 结构域,该结构域包含一个亮氨酸拉链区,一个碱性结构域和一个谷氨酰胺丰富区。实时荧光定量 PCR 分析显示,在快速脱水、缓慢脱水和脱水后复水处理过程中,东亚砂藓 RjbZIP 基因均能被诱导表达,且对脱水后复水的反应更为迅速,推测该基因参与东亚砂藓抵抗逆境胁迫的应答,为后续进一步研究其功能特征奠定了基础。
為研究 bZIP 轉錄因子在苔蘚植物中的生物學功能,以東亞砂蘚轉錄組測序穫得的一箇與 bZIP 轉錄因子同源性較高的基因片段為基礎,採用 RT-PCR 技術剋隆得到該基因的 cDNA 全長序列,命名為 RjbZIP。該基因 cDNA 全長為1477 bp,包含1箇1422 bp 的開放閱讀框,編碼473箇氨基痠,預測蛋白分子量為5.114 kDa,等電點為6.97。RjbZIP 蛋白屬于不穩定蛋白,無跨膜區和信號肽結構,亞細胞定位于細胞覈。該蛋白含有典型的 bZIP 結構域,該結構域包含一箇亮氨痠拉鏈區,一箇堿性結構域和一箇穀氨酰胺豐富區。實時熒光定量 PCR 分析顯示,在快速脫水、緩慢脫水和脫水後複水處理過程中,東亞砂蘚 RjbZIP 基因均能被誘導錶達,且對脫水後複水的反應更為迅速,推測該基因參與東亞砂蘚牴抗逆境脅迫的應答,為後續進一步研究其功能特徵奠定瞭基礎。
위연구 bZIP 전록인자재태선식물중적생물학공능,이동아사선전록조측서획득적일개여 bZIP 전록인자동원성교고적기인편단위기출,채용 RT-PCR 기술극륭득도해기인적 cDNA 전장서렬,명명위 RjbZIP。해기인 cDNA 전장위1477 bp,포함1개1422 bp 적개방열독광,편마473개안기산,예측단백분자량위5.114 kDa,등전점위6.97。RjbZIP 단백속우불은정단백,무과막구화신호태결구,아세포정위우세포핵。해단백함유전형적 bZIP 결구역,해결구역포함일개량안산랍련구,일개감성결구역화일개곡안선알봉부구。실시형광정량 PCR 분석현시,재쾌속탈수、완만탈수화탈수후복수처리과정중,동아사선 RjbZIP 기인균능피유도표체,차대탈수후복수적반응경위신속,추측해기인삼여동아사선저항역경협박적응답,위후속진일보연구기공능특정전정료기출。
In order to study biological function of bZIP transcription factor in bryophytes,a full length cDNA se-quence of bZIP transcription factor was cloned from Racomitrium japonicum using RT-PCR,named RjbZIP.The full length of RjbZIP cDNA sequence was 1 477 bp,containing a 1 422 bp open reading frame (ORF),and encoding a protein of 473 amino acids,molecular weight was 5.1 1 4 kDa and theoretical pI was 6.97.The predicted RjbZIP protein belonged to unstable protein,and located in nuclues without transmembrane structure and signal peptide. The protein contained a typical structure of bZIP domain,including one leucine zipper motif,one basic domain and one glutamine rich.domain.The quantitative RT-PCR results showed that RjbZIP gene could express in the proceed of quick dehydration,slow dehydration and rehydration,and its transcriptional responses subject to rehydration was the most sensitive.Therefore,the RjbZIP gene was speculated to participate the stress reaction of R.japonicum,and the results laid the foundations for the further study on its function.