广西医科大学学报
廣西醫科大學學報
엄서의과대학학보
Journal of Guangxi Medical University
2015年
3期
361-364
,共4页
孙菁%李珏燕%陈智平%张成林%蔡豪斌
孫菁%李玨燕%陳智平%張成林%蔡豪斌
손정%리각연%진지평%장성림%채호빈
血红蛋白%纯化%血红蛋白单克隆抗体%双抗夹心法%高特异性
血紅蛋白%純化%血紅蛋白單剋隆抗體%雙抗夾心法%高特異性
혈홍단백%순화%혈홍단백단극륭항체%쌍항협심법%고특이성
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目的:获得高纯度的人血红蛋白(Hb)抗原,并用其免疫小鼠,筛选获得高特异性抗人血红蛋白单克隆抗体(mAb-Hb),为建立高灵敏度、高特异性人粪便潜血免疫检测法提供关键试剂.方法:选择CM-Sepharose Fast Flow (CM50)阳离子柱进行分离纯化获得高纯度Hb,进而用其免疫小鼠,经融合制备获得了11株可特异性分泌mAb-Hb的杂交瘤细胞.获得的11株mAb-Hb用双抗夹心方法竞争配对,及与其他实验动物Hb进行交叉反应来筛选检测mAb-Hb的特异性.结果:获得的11株mAb-Hb经双抗夹心法进行竞争配对及与其他实验动物Hb进行交叉反应,得到7E12、1H7两株高特异性的mAb-Hb,且7E12和1H7、1D11、6C4配对效果较好.结论:用此方法获得了配对效果较好的mAb-Hb,可用于纯化Hb抗原的鉴定;筛选获得的高特异性mAb-Hb,可进一步应用于高灵敏度、高特异性免疫法检测粪便潜血(FOB).
目的:穫得高純度的人血紅蛋白(Hb)抗原,併用其免疫小鼠,篩選穫得高特異性抗人血紅蛋白單剋隆抗體(mAb-Hb),為建立高靈敏度、高特異性人糞便潛血免疫檢測法提供關鍵試劑.方法:選擇CM-Sepharose Fast Flow (CM50)暘離子柱進行分離純化穫得高純度Hb,進而用其免疫小鼠,經融閤製備穫得瞭11株可特異性分泌mAb-Hb的雜交瘤細胞.穫得的11株mAb-Hb用雙抗夾心方法競爭配對,及與其他實驗動物Hb進行交扠反應來篩選檢測mAb-Hb的特異性.結果:穫得的11株mAb-Hb經雙抗夾心法進行競爭配對及與其他實驗動物Hb進行交扠反應,得到7E12、1H7兩株高特異性的mAb-Hb,且7E12和1H7、1D11、6C4配對效果較好.結論:用此方法穫得瞭配對效果較好的mAb-Hb,可用于純化Hb抗原的鑒定;篩選穫得的高特異性mAb-Hb,可進一步應用于高靈敏度、高特異性免疫法檢測糞便潛血(FOB).
목적:획득고순도적인혈홍단백(Hb)항원,병용기면역소서,사선획득고특이성항인혈홍단백단극륭항체(mAb-Hb),위건립고령민도、고특이성인분편잠혈면역검측법제공관건시제.방법:선택CM-Sepharose Fast Flow (CM50)양리자주진행분리순화획득고순도Hb,진이용기면역소서,경융합제비획득료11주가특이성분비mAb-Hb적잡교류세포.획득적11주mAb-Hb용쌍항협심방법경쟁배대,급여기타실험동물Hb진행교차반응래사선검측mAb-Hb적특이성.결과:획득적11주mAb-Hb경쌍항협심법진행경쟁배대급여기타실험동물Hb진행교차반응,득도7E12、1H7량주고특이성적mAb-Hb,차7E12화1H7、1D11、6C4배대효과교호.결론:용차방법획득료배대효과교호적mAb-Hb,가용우순화Hb항원적감정;사선획득적고특이성mAb-Hb,가진일보응용우고령민도、고특이성면역법검측분편잠혈(FOB).
