兰州大学学报(医学版)
蘭州大學學報(醫學版)
란주대학학보(의학판)
Journal of Lanzhou University (Medical Sciences)
2015年
4期
1-9
,共9页
刘刚强%张诚%刘毅%亢婷%王刚
劉剛彊%張誠%劉毅%亢婷%王剛
류강강%장성%류의%항정%왕강
人脂肪间充质干细胞%人脐静脉内皮细胞%丝素蛋白%支架%共培养体系%组织工程脂肪
人脂肪間充質榦細胞%人臍靜脈內皮細胞%絲素蛋白%支架%共培養體繫%組織工程脂肪
인지방간충질간세포%인제정맥내피세포%사소단백%지가%공배양체계%조직공정지방
human adipose mesenchymal stem cells%human umbilical vascular endothelial cells%silk fibroin%scaffold%co-culture system%tissue engineered adipose
目的 探讨人脂肪间充质干细胞(hADSCs)与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养后,共培养体系与丝素蛋白支架联合构建组织工程脂肪的可行性.方法 从人体正常脂肪组织中提取hADCSs,培养并扩增,行成脂及成骨诱导鉴定hADCSs的多向分化特性;流式细胞术检测hADCSs表面分子CD34、CD44、CD45、CD90,检测HUVEC表面分子CD31及CD34;测定hADCSs与HUVEC增殖曲线,探讨共培养比例;将共培养体系种植于丝素蛋白支架后行电镜扫描;成脂诱导14d后,反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定成脂基因PPARγ-2的表达.结果 hADSCs可以向脂肪细胞及成骨细胞分化;流式细胞术检测hADSCs结果显示CD34(+)、CD44(+)、CD45(-)、CD90(-),检测HUVEC结果显示CD31(+)、CD34弱阳性;HUVEC增殖速度快于hADSCs,以HUVEC:hADSCs为1∶4比例接种于培养皿培养3d后,细胞融合时两者比例约为1∶1;共培养体系接种于丝素蛋白支架成脂诱导14d后,通过RT-PCR成功测定出PPARγ-2基因的表达.结论 hADSCs与HUVEC共培养,在体外可成功构建出组织工程脂肪.
目的 探討人脂肪間充質榦細胞(hADSCs)與人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)共培養後,共培養體繫與絲素蛋白支架聯閤構建組織工程脂肪的可行性.方法 從人體正常脂肪組織中提取hADCSs,培養併擴增,行成脂及成骨誘導鑒定hADCSs的多嚮分化特性;流式細胞術檢測hADCSs錶麵分子CD34、CD44、CD45、CD90,檢測HUVEC錶麵分子CD31及CD34;測定hADCSs與HUVEC增殖麯線,探討共培養比例;將共培養體繫種植于絲素蛋白支架後行電鏡掃描;成脂誘導14d後,反轉錄—聚閤酶鏈反應(RT-PCR)鑒定成脂基因PPARγ-2的錶達.結果 hADSCs可以嚮脂肪細胞及成骨細胞分化;流式細胞術檢測hADSCs結果顯示CD34(+)、CD44(+)、CD45(-)、CD90(-),檢測HUVEC結果顯示CD31(+)、CD34弱暘性;HUVEC增殖速度快于hADSCs,以HUVEC:hADSCs為1∶4比例接種于培養皿培養3d後,細胞融閤時兩者比例約為1∶1;共培養體繫接種于絲素蛋白支架成脂誘導14d後,通過RT-PCR成功測定齣PPARγ-2基因的錶達.結論 hADSCs與HUVEC共培養,在體外可成功構建齣組織工程脂肪.
목적 탐토인지방간충질간세포(hADSCs)여인제정맥내피세포(HUVEC)공배양후,공배양체계여사소단백지가연합구건조직공정지방적가행성.방법 종인체정상지방조직중제취hADCSs,배양병확증,행성지급성골유도감정hADCSs적다향분화특성;류식세포술검측hADCSs표면분자CD34、CD44、CD45、CD90,검측HUVEC표면분자CD31급CD34;측정hADCSs여HUVEC증식곡선,탐토공배양비례;장공배양체계충식우사소단백지가후행전경소묘;성지유도14d후,반전록—취합매련반응(RT-PCR)감정성지기인PPARγ-2적표체.결과 hADSCs가이향지방세포급성골세포분화;류식세포술검측hADSCs결과현시CD34(+)、CD44(+)、CD45(-)、CD90(-),검측HUVEC결과현시CD31(+)、CD34약양성;HUVEC증식속도쾌우hADSCs,이HUVEC:hADSCs위1∶4비례접충우배양명배양3d후,세포융합시량자비례약위1∶1;공배양체계접충우사소단백지가성지유도14d후,통과RT-PCR성공측정출PPARγ-2기인적표체.결론 hADSCs여HUVEC공배양,재체외가성공구건출조직공정지방.