临床肾脏病杂志
臨床腎髒病雜誌
림상신장병잡지
Journal of Clinical Nephrology
2015年
5期
297-301
,共5页
常晓艳%张颖%杨倩%黄帅%徐钢
常曉豔%張穎%楊倩%黃帥%徐鋼
상효염%장영%양천%황수%서강
血管内皮生长因子C%顺铂%上皮细胞
血管內皮生長因子C%順鉑%上皮細胞
혈관내피생장인자C%순박%상피세포
Vascular endothelial growth factor-C%Cisplatin%Epithelial Cells
目的 观察血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)在顺铂诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)毒性损伤模型中mRNA的表达变化,探究VEGF-C对顺铂诱导人肾小管上皮细胞毒性损伤的作用和介导其作用的相关分子机制.方法 体外培养人近端肾小管上皮细胞系,用不同浓度的顺铂刺激HK-2细胞24 h后,利用实时荧光定量RT-PCR法检测HK-2细胞VEGF-C mRNA的表达变化,CCK8法检测不同浓度的顺铂对HK-2细胞存活率的影响.分别用0、50、100、200 ng/ml的人重组VEGF-C因子预培养HK-2细胞4h后,再加入50 μmol/L的顺铂和一定浓度的VEGF-C继续培养HK-2细胞24 h,利用CCK8法检测细胞存活率的变化,明确VEGF-C对顺铂诱导的肾小管上皮细胞毒性损伤的作用.用不同浓度的VEGF-C刺激HK-2细胞30min后,Western blot方法检测细胞p-Akt、Akt、p-Erk、Erk、p-p38及p38蛋白水平的变化.结果 不同浓度的顺铂刺激HK-2细胞后细胞VEGF-C mRNA水平的表达呈现先上升后下降的趋势.顺铂能引起HK-2细胞存活率减低,并呈现浓度依赖性.而外源性加入VEGF-C能减轻顺铂所导致的HK-2细胞毒性损伤,提高细胞的存活率,并且VEGF-C浓度为200 ng/ml时对HK-2细胞的保护作用最明显.不同浓度的VEGF-C刺激HK-2细胞30 min,随着VEGF-C浓度的增加,HK-2细胞p-Akt、p-Erk的表达也逐渐增加,而Akt、Erk、p-p38及p38表达不变.结论 VEGF-C能减轻顺铂诱导的肾小管上皮细胞毒性损伤,提高细胞的存活率,其作用机制可能与激活细胞内PI3K/Akt及MAPK/Erk信号通路有关.
目的 觀察血管內皮生長因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)在順鉑誘導的人腎小管上皮細胞(HK-2)毒性損傷模型中mRNA的錶達變化,探究VEGF-C對順鉑誘導人腎小管上皮細胞毒性損傷的作用和介導其作用的相關分子機製.方法 體外培養人近耑腎小管上皮細胞繫,用不同濃度的順鉑刺激HK-2細胞24 h後,利用實時熒光定量RT-PCR法檢測HK-2細胞VEGF-C mRNA的錶達變化,CCK8法檢測不同濃度的順鉑對HK-2細胞存活率的影響.分彆用0、50、100、200 ng/ml的人重組VEGF-C因子預培養HK-2細胞4h後,再加入50 μmol/L的順鉑和一定濃度的VEGF-C繼續培養HK-2細胞24 h,利用CCK8法檢測細胞存活率的變化,明確VEGF-C對順鉑誘導的腎小管上皮細胞毒性損傷的作用.用不同濃度的VEGF-C刺激HK-2細胞30min後,Western blot方法檢測細胞p-Akt、Akt、p-Erk、Erk、p-p38及p38蛋白水平的變化.結果 不同濃度的順鉑刺激HK-2細胞後細胞VEGF-C mRNA水平的錶達呈現先上升後下降的趨勢.順鉑能引起HK-2細胞存活率減低,併呈現濃度依賴性.而外源性加入VEGF-C能減輕順鉑所導緻的HK-2細胞毒性損傷,提高細胞的存活率,併且VEGF-C濃度為200 ng/ml時對HK-2細胞的保護作用最明顯.不同濃度的VEGF-C刺激HK-2細胞30 min,隨著VEGF-C濃度的增加,HK-2細胞p-Akt、p-Erk的錶達也逐漸增加,而Akt、Erk、p-p38及p38錶達不變.結論 VEGF-C能減輕順鉑誘導的腎小管上皮細胞毒性損傷,提高細胞的存活率,其作用機製可能與激活細胞內PI3K/Akt及MAPK/Erk信號通路有關.
목적 관찰혈관내피생장인자C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)재순박유도적인신소관상피세포(HK-2)독성손상모형중mRNA적표체변화,탐구VEGF-C대순박유도인신소관상피세포독성손상적작용화개도기작용적상관분자궤제.방법 체외배양인근단신소관상피세포계,용불동농도적순박자격HK-2세포24 h후,이용실시형광정량RT-PCR법검측HK-2세포VEGF-C mRNA적표체변화,CCK8법검측불동농도적순박대HK-2세포존활솔적영향.분별용0、50、100、200 ng/ml적인중조VEGF-C인자예배양HK-2세포4h후,재가입50 μmol/L적순박화일정농도적VEGF-C계속배양HK-2세포24 h,이용CCK8법검측세포존활솔적변화,명학VEGF-C대순박유도적신소관상피세포독성손상적작용.용불동농도적VEGF-C자격HK-2세포30min후,Western blot방법검측세포p-Akt、Akt、p-Erk、Erk、p-p38급p38단백수평적변화.결과 불동농도적순박자격HK-2세포후세포VEGF-C mRNA수평적표체정현선상승후하강적추세.순박능인기HK-2세포존활솔감저,병정현농도의뢰성.이외원성가입VEGF-C능감경순박소도치적HK-2세포독성손상,제고세포적존활솔,병차VEGF-C농도위200 ng/ml시대HK-2세포적보호작용최명현.불동농도적VEGF-C자격HK-2세포30 min,수착VEGF-C농도적증가,HK-2세포p-Akt、p-Erk적표체야축점증가,이Akt、Erk、p-p38급p38표체불변.결론 VEGF-C능감경순박유도적신소관상피세포독성손상,제고세포적존활솔,기작용궤제가능여격활세포내PI3K/Akt급MAPK/Erk신호통로유관.
