氨基酸和生物资源
氨基痠和生物資源
안기산화생물자원
Amino Acids and Biotic Resources
2015年
3期
69-74
,共6页
任丽梅%成志远%李晓静%吴会广%袁国强
任麗梅%成誌遠%李曉靜%吳會廣%袁國彊
임려매%성지원%리효정%오회엄%원국강
精氨酸脱亚胺酶%L-精氨酸%L-瓜氨酸%酶转化法
精氨痠脫亞胺酶%L-精氨痠%L-瓜氨痠%酶轉化法
정안산탈아알매%L-정안산%L-과안산%매전화법
arginine deiminase%L-arginine%L-citrulline%enzyme conversion method
目前,L-瓜氨酸的主要生产方法为化学法水解L-精氨酸.利用精氨酸脱亚胺酶可以直接转化L-精氨酸获得L-瓜氨酸,条件温和、效率高、环境友好,因而在工业化生产中具有很好的应用前景.本研究将优化后的单增李斯特菌(Listeriamonocytogenes)精氨酸脱亚胺酶(ADI)基因序列分别克隆到相应的载体pET-21a、pWB980及pAO815中,并分别转化大肠杆菌BL21(DE3)、枯草芽胞杆菌WB600及毕赤酵母GS115中构建表达菌株.发现大肠杆菌能高效表达ADI.经过5L发酵罐验证,发酵后酶活力单位可达200 000～270 000 U·L-1.经过验证,该酶可以很好地应用于L-瓜氨酸生产.在7 920～17 600 U· L-1的ADI存在条件下,5.5h内,可使95％的浓度为94～258 g·L-1的精氨酸转化为瓜氨酸.该方法具备良好的工业化应用前景.
目前,L-瓜氨痠的主要生產方法為化學法水解L-精氨痠.利用精氨痠脫亞胺酶可以直接轉化L-精氨痠穫得L-瓜氨痠,條件溫和、效率高、環境友好,因而在工業化生產中具有很好的應用前景.本研究將優化後的單增李斯特菌(Listeriamonocytogenes)精氨痠脫亞胺酶(ADI)基因序列分彆剋隆到相應的載體pET-21a、pWB980及pAO815中,併分彆轉化大腸桿菌BL21(DE3)、枯草芽胞桿菌WB600及畢赤酵母GS115中構建錶達菌株.髮現大腸桿菌能高效錶達ADI.經過5L髮酵罐驗證,髮酵後酶活力單位可達200 000～270 000 U·L-1.經過驗證,該酶可以很好地應用于L-瓜氨痠生產.在7 920～17 600 U· L-1的ADI存在條件下,5.5h內,可使95％的濃度為94～258 g·L-1的精氨痠轉化為瓜氨痠.該方法具備良好的工業化應用前景.
목전,L-과안산적주요생산방법위화학법수해L-정안산.이용정안산탈아알매가이직접전화L-정안산획득L-과안산,조건온화、효솔고、배경우호,인이재공업화생산중구유흔호적응용전경.본연구장우화후적단증리사특균(Listeriamonocytogenes)정안산탈아알매(ADI)기인서렬분별극륭도상응적재체pET-21a、pWB980급pAO815중,병분별전화대장간균BL21(DE3)、고초아포간균WB600급필적효모GS115중구건표체균주.발현대장간균능고효표체ADI.경과5L발효관험증,발효후매활력단위가체200 000～270 000 U·L-1.경과험증,해매가이흔호지응용우L-과안산생산.재7 920～17 600 U· L-1적ADI존재조건하,5.5h내,가사95％적농도위94～258 g·L-1적정안산전화위과안산.해방법구비량호적공업화응용전경.
