天津农业科学
天津農業科學
천진농업과학
Tianjin Agricultural Sciences
2015年
9期
13-18
,共6页
周瑶瑶%陈春妍%陈鹏%刁勇%周瑞阳
週瑤瑤%陳春妍%陳鵬%刁勇%週瑞暘
주요요%진춘연%진붕%조용%주서양
红麻%花药%花瓣%RNA提取
紅痳%花藥%花瓣%RNA提取
홍마%화약%화판%RNA제취
红麻(Hibiscus cannabinus L.)花药和花瓣因含有较多的多糖、酚类等物质而较难提取高质量的RNA,本研究探索一种适用于红麻花药和花瓣高质量总RNA的方法以进行cDNA文库构建等后续试验.通过借鉴植物DNA的CTAB提取法,结合RNA的理化性质,在提取液中加入6％的β-巯基乙醇,并在开始裂解时加入1/10体积的5 mol·L-1KAc和1/10体积的无水乙醇对去除多糖特别有效.结果显示,利用该方法得到的RNA质量高,条带清晰完整,检测OD260/280在1.8～2.1之间,OD 260/230在2.0～2.6之间,产量为花药987.3 ng· μL-1,花瓣752.1 ng· μL-1.该方法提取的总RNA可直接用于mRNA纯化,cDNA文库构建及RT-PCR等后续分子试验.
紅痳(Hibiscus cannabinus L.)花藥和花瓣因含有較多的多糖、酚類等物質而較難提取高質量的RNA,本研究探索一種適用于紅痳花藥和花瓣高質量總RNA的方法以進行cDNA文庫構建等後續試驗.通過藉鑒植物DNA的CTAB提取法,結閤RNA的理化性質,在提取液中加入6％的β-巰基乙醇,併在開始裂解時加入1/10體積的5 mol·L-1KAc和1/10體積的無水乙醇對去除多糖特彆有效.結果顯示,利用該方法得到的RNA質量高,條帶清晰完整,檢測OD260/280在1.8～2.1之間,OD 260/230在2.0～2.6之間,產量為花藥987.3 ng· μL-1,花瓣752.1 ng· μL-1.該方法提取的總RNA可直接用于mRNA純化,cDNA文庫構建及RT-PCR等後續分子試驗.
홍마(Hibiscus cannabinus L.)화약화화판인함유교다적다당、분류등물질이교난제취고질량적RNA,본연구탐색일충괄용우홍마화약화화판고질량총RNA적방법이진행cDNA문고구건등후속시험.통과차감식물DNA적CTAB제취법,결합RNA적이화성질,재제취액중가입6％적β-구기을순,병재개시렬해시가입1/10체적적5 mol·L-1KAc화1/10체적적무수을순대거제다당특별유효.결과현시,이용해방법득도적RNA질량고,조대청석완정,검측OD260/280재1.8～2.1지간,OD 260/230재2.0～2.6지간,산량위화약987.3 ng· μL-1,화판752.1 ng· μL-1.해방법제취적총RNA가직접용우mRNA순화,cDNA문고구건급RT-PCR등후속분자시험.
