现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
Journal of Modern Laboratory Medicine
2015年
4期
10-13
,共4页
胡纪文%杨锡琴%宗克亮%郭兰芹%宋晓国%王国华%刘喜明%朱翠侠%赵琰枫%冯晓燕%张贺秋
鬍紀文%楊錫琴%宗剋亮%郭蘭芹%宋曉國%王國華%劉喜明%硃翠俠%趙琰楓%馮曉燕%張賀鞦
호기문%양석금%종극량%곽란근%송효국%왕국화%류희명%주취협%조염풍%풍효연%장하추
人羧基肽酶H%自身抗体%新诊断2型糖尿病%成人隐匿性自身免疫性糖尿病
人羧基肽酶H%自身抗體%新診斷2型糖尿病%成人隱匿性自身免疫性糖尿病
인최기태매H%자신항체%신진단2형당뇨병%성인은닉성자신면역성당뇨병
human carboxypeptidase H%autoantibody%newly diagnosed type 2 diabetes%latent autoimmune diabetes in adults
目的：构建人羧基肽酶 H 不同区段抗原的原核表达载体，诱导表达获得重组蛋白，初步验证人羧基肽酶 H 不同抗原区段在羧基肽酶 H 自身抗体检测中的应用价值。方法应用 RT-PCR 方法调取目的基因，构建相应的原核表达质粒，转化大肠埃希氏菌诱导表达重组蛋白，用重组蛋白作为包被抗原建立人羧基肽酶 H 自身抗体的间接 ELISA 方法，评价羧基肽酶 H 抗原在检测新诊断2型糖尿病患者抗羧基肽酶 H 自身抗体中的应用价值。结果获得了羧基肽酶 H 三种不同区段抗原，其中42～476氨基酸区段为较理想的抗原。以该全长抗原作为包被抗原检测95例新诊断2型糖尿病患者，羧基肽酶 H 自身抗体阳性率为8.42％。结论原核克隆表达的人羧基肽酶 H 42～476氨基酸区段抗原具有良好的抗原性，可作为成人隐匿性自身免疫性糖尿病鉴别诊断的候选抗原。
目的：構建人羧基肽酶 H 不同區段抗原的原覈錶達載體，誘導錶達穫得重組蛋白，初步驗證人羧基肽酶 H 不同抗原區段在羧基肽酶 H 自身抗體檢測中的應用價值。方法應用 RT-PCR 方法調取目的基因，構建相應的原覈錶達質粒，轉化大腸埃希氏菌誘導錶達重組蛋白，用重組蛋白作為包被抗原建立人羧基肽酶 H 自身抗體的間接 ELISA 方法，評價羧基肽酶 H 抗原在檢測新診斷2型糖尿病患者抗羧基肽酶 H 自身抗體中的應用價值。結果穫得瞭羧基肽酶 H 三種不同區段抗原，其中42～476氨基痠區段為較理想的抗原。以該全長抗原作為包被抗原檢測95例新診斷2型糖尿病患者，羧基肽酶 H 自身抗體暘性率為8.42％。結論原覈剋隆錶達的人羧基肽酶 H 42～476氨基痠區段抗原具有良好的抗原性，可作為成人隱匿性自身免疫性糖尿病鑒彆診斷的候選抗原。
목적：구건인최기태매 H 불동구단항원적원핵표체재체，유도표체획득중조단백，초보험증인최기태매 H 불동항원구단재최기태매 H 자신항체검측중적응용개치。방법응용 RT-PCR 방법조취목적기인，구건상응적원핵표체질립，전화대장애희씨균유도표체중조단백，용중조단백작위포피항원건립인최기태매 H 자신항체적간접 ELISA 방법，평개최기태매 H 항원재검측신진단2형당뇨병환자항최기태매 H 자신항체중적응용개치。결과획득료최기태매 H 삼충불동구단항원，기중42～476안기산구단위교이상적항원。이해전장항원작위포피항원검측95례신진단2형당뇨병환자，최기태매 H 자신항체양성솔위8.42％。결론원핵극륭표체적인최기태매 H 42～476안기산구단항원구유량호적항원성，가작위성인은닉성자신면역성당뇨병감별진단적후선항원。
Objective To obtain different fragments of human carboxypeptidase H,and evaluate the diagnostic application of the recombination carboxypeptidase H in detecting autoantibody.Methods The coding gene of carboxypeptidase H was ob-tained by RT-PCR.The corresponding prokaryotic expression vectors were constructed and transformed into E.coli to in-duce the expression of the recombination different fragments of carboxypeptidase H.Using these antigen fragments as the coating antigens,the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)was established for the detection of carboxypeptidase H autoantibody in 95 newly diagnosed type 2 diabetes patients.Results Three fragments of human carboxypeptidase H were obtained,in which the 42~476aa fragment antigen was ideal one.Using the full-length carboxypeptidase H as coating anti-gen,the positive rate of carboxypeptidase H autoantibody was 8.42%.Conclusion Because of the favorable antigenicity,the 42~476aa fragment antigen of carboxypeptidase H could be the candidate antigen for discrimination and diagnosis of latent autoimmune diabetes in adults.
