动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
Progress in Veterinary Medicine
2015年
10期
15-19
,共5页
张海霞%马玉梅%包晓婧%徐雷%李向茸%谢晶莹%马忠仁%冯若飞
張海霞%馬玉梅%包曉婧%徐雷%李嚮茸%謝晶瑩%馬忠仁%馮若飛
장해하%마옥매%포효청%서뢰%리향용%사정형%마충인%풍약비
膜连蛋白A2%SYBR GreenⅠ实时荧光定量聚合酶链反应%检测
膜連蛋白A2%SYBR GreenⅠ實時熒光定量聚閤酶鏈反應%檢測
막련단백A2%SYBR GreenⅠ실시형광정량취합매련반응%검측
Annexin A2 (AnxA2)%SYBR Green Ⅰ real-time PCR%detection
为建立膜连蛋白 A2(AnxA2)基因 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量 PCR 检测方法,根据 Gen-Bank 中公布的 AnxA2基因序列设计并合成引物,经过条件优化,建立了 AnxA2 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量 PCR 检测方法。该方法线性关系较好,以质粒标准品构建的标准曲线相关系数 R2为0.999;灵敏性好,比普通 PCR 灵敏100倍。应用建立的方法对随机选取的几种哺乳动物细胞进行检测。结果表明,建立的方法能成功检出不同细胞中 AnxA2含量。表明本研究建立的 AnxA2 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR 检测方法灵敏性高,重复性好,可用于 AnxA2的检测及定量分析。
為建立膜連蛋白 A2(AnxA2)基因 SYBR Green Ⅰ實時熒光定量 PCR 檢測方法,根據 Gen-Bank 中公佈的 AnxA2基因序列設計併閤成引物,經過條件優化,建立瞭 AnxA2 SYBR Green Ⅰ實時熒光定量 PCR 檢測方法。該方法線性關繫較好,以質粒標準品構建的標準麯線相關繫數 R2為0.999;靈敏性好,比普通 PCR 靈敏100倍。應用建立的方法對隨機選取的幾種哺乳動物細胞進行檢測。結果錶明,建立的方法能成功檢齣不同細胞中 AnxA2含量。錶明本研究建立的 AnxA2 SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR 檢測方法靈敏性高,重複性好,可用于 AnxA2的檢測及定量分析。
위건립막련단백 A2(AnxA2)기인 SYBR Green Ⅰ실시형광정량 PCR 검측방법,근거 Gen-Bank 중공포적 AnxA2기인서렬설계병합성인물,경과조건우화,건립료 AnxA2 SYBR Green Ⅰ실시형광정량 PCR 검측방법。해방법선성관계교호,이질립표준품구건적표준곡선상관계수 R2위0.999;령민성호,비보통 PCR 령민100배。응용건립적방법대수궤선취적궤충포유동물세포진행검측。결과표명,건립적방법능성공검출불동세포중 AnxA2함량。표명본연구건립적 AnxA2 SYBR Green Ⅰ실시형광정량PCR 검측방법령민성고,중복성호,가용우 AnxA2적검측급정량분석。
In order to establish AnxA2 SYBR Green I real-time PCR,one pair of primers were designed and synthesized based on the published gene sequence of AnxA2 in GenBank.After optimizing the reaction con-ditions,AnxA2 SYBR Green I real-time PCR was established with good linear relationship,and the stand-ard calibration curve correlation coefficient R2 was 0 .999 for standard plasmid.It also had good sensitivity, about 100 times more sensitive than conventional PCR.We also detected several randomly selected mam-malian cells with this method.The results showed that the method could successfully detect the content of AnxA2 in different cells.It proved that the established AnxA2 SYBR Green I real-time PCR was of high sensitivity,good reproducibility and could be used in the detection of AnxA2 and quantitative analysis.