医用生物力学
醫用生物力學
의용생물역학
Journal of Medical Biomechanics
2015年
4期
339-345
,共7页
王聪聪%姚庆苹%马英英%王凯旋%齐颖新%姜宗来
王聰聰%姚慶蘋%馬英英%王凱鏇%齊穎新%薑宗來
왕총총%요경평%마영영%왕개선%제영신%강종래
切应力%血管内皮细胞%血管平滑肌细胞%细胞增殖
切應力%血管內皮細胞%血管平滑肌細胞%細胞增殖
절응력%혈관내피세포%혈관평활기세포%세포증식
Low shear stress%Endothelial cells (ECs)%Vascular smooth muscle cells (VSMCs)%Cell proliferation
目的 探讨microRNA-34a(miR-34a)在低切应力诱导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖中的作用.方法 应用细胞联合培养平行平板流动腔系统对与VSMCs联合培养的内皮细胞(endothelial cells,ECs)施加1.5 Pa正常切应力(normal shear stress,NSS)和0.5 Pa低切应力(low shear stress,LowSS),加载时间为12h.Western blotting检测联合培养VSMCs的增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达,以此反映VSMCs的增殖能力.实时PCR检测联合培养VSMCs的miR-34a表达变化.通过TargetScan、miRWalk等网站预测miR-34a的下游靶蛋白.Western blotting检测联合培养VSMCs的miR-34a靶蛋白Forkhead转录因子J2(forkhead box j2,Foxj2)表达.通过mimics和inhibitor转染技术,分别上调和抑制VSMCs的miR-34a表达,Westernblotting检测Foxj2及PCNA的表达变化,验证miR-34a和Foxj2之间的调控关系.结果 与NSS相比,LowSS促进联合培养VSMCs的PCNA表达,并显著上调联合培养VSMCs的miR-34a表达.通过TargetScan、miRWalk等网站预测miR-34a的下游靶蛋白为Foxj2.LowSS加载下联合培养VSMCs的miR-34a靶蛋白Fox j2表达明显降低.静态条件下上调VSMCs的miR-34a表达,靶蛋白Fox j2表达明显降低,PCNA表达显著升高;抑制VSMCs的miR-34a表达,靶蛋白Foxj2表达明显上调,PCNA表达显著降低.结论 LowSS通过调控联合培养VSMCs的miR-34a和靶蛋白Fox j2,促进VSMCs增殖.研究结果为进一步阐明动脉粥样硬化疾病的发病机制及药物治疗靶标提供新的力学生物学实验依据.
目的 探討microRNA-34a(miR-34a)在低切應力誘導血管平滑肌細胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖中的作用.方法 應用細胞聯閤培養平行平闆流動腔繫統對與VSMCs聯閤培養的內皮細胞(endothelial cells,ECs)施加1.5 Pa正常切應力(normal shear stress,NSS)和0.5 Pa低切應力(low shear stress,LowSS),加載時間為12h.Western blotting檢測聯閤培養VSMCs的增殖細胞覈抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白錶達,以此反映VSMCs的增殖能力.實時PCR檢測聯閤培養VSMCs的miR-34a錶達變化.通過TargetScan、miRWalk等網站預測miR-34a的下遊靶蛋白.Western blotting檢測聯閤培養VSMCs的miR-34a靶蛋白Forkhead轉錄因子J2(forkhead box j2,Foxj2)錶達.通過mimics和inhibitor轉染技術,分彆上調和抑製VSMCs的miR-34a錶達,Westernblotting檢測Foxj2及PCNA的錶達變化,驗證miR-34a和Foxj2之間的調控關繫.結果 與NSS相比,LowSS促進聯閤培養VSMCs的PCNA錶達,併顯著上調聯閤培養VSMCs的miR-34a錶達.通過TargetScan、miRWalk等網站預測miR-34a的下遊靶蛋白為Foxj2.LowSS加載下聯閤培養VSMCs的miR-34a靶蛋白Fox j2錶達明顯降低.靜態條件下上調VSMCs的miR-34a錶達,靶蛋白Fox j2錶達明顯降低,PCNA錶達顯著升高;抑製VSMCs的miR-34a錶達,靶蛋白Foxj2錶達明顯上調,PCNA錶達顯著降低.結論 LowSS通過調控聯閤培養VSMCs的miR-34a和靶蛋白Fox j2,促進VSMCs增殖.研究結果為進一步闡明動脈粥樣硬化疾病的髮病機製及藥物治療靶標提供新的力學生物學實驗依據.
목적 탐토microRNA-34a(miR-34a)재저절응력유도혈관평활기세포(vascular smooth muscle cells,VSMCs)증식중적작용.방법 응용세포연합배양평행평판류동강계통대여VSMCs연합배양적내피세포(endothelial cells,ECs)시가1.5 Pa정상절응력(normal shear stress,NSS)화0.5 Pa저절응력(low shear stress,LowSS),가재시간위12h.Western blotting검측연합배양VSMCs적증식세포핵항원(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)단백표체,이차반영VSMCs적증식능력.실시PCR검측연합배양VSMCs적miR-34a표체변화.통과TargetScan、miRWalk등망참예측miR-34a적하유파단백.Western blotting검측연합배양VSMCs적miR-34a파단백Forkhead전록인자J2(forkhead box j2,Foxj2)표체.통과mimics화inhibitor전염기술,분별상조화억제VSMCs적miR-34a표체,Westernblotting검측Foxj2급PCNA적표체변화,험증miR-34a화Foxj2지간적조공관계.결과 여NSS상비,LowSS촉진연합배양VSMCs적PCNA표체,병현저상조연합배양VSMCs적miR-34a표체.통과TargetScan、miRWalk등망참예측miR-34a적하유파단백위Foxj2.LowSS가재하연합배양VSMCs적miR-34a파단백Fox j2표체명현강저.정태조건하상조VSMCs적miR-34a표체,파단백Fox j2표체명현강저,PCNA표체현저승고;억제VSMCs적miR-34a표체,파단백Foxj2표체명현상조,PCNA표체현저강저.결론 LowSS통과조공연합배양VSMCs적miR-34a화파단백Fox j2,촉진VSMCs증식.연구결과위진일보천명동맥죽양경화질병적발병궤제급약물치료파표제공신적역학생물학실험의거.
