中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine
2015年
9期
674-678
,共5页
胡亮%郭东伟%李江南%尹曼曼%黄丽%翁长江
鬍亮%郭東偉%李江南%尹曼曼%黃麗%翁長江
호량%곽동위%리강남%윤만만%황려%옹장강
猪繁殖与呼吸综合征病毒%Nsp9%酵母双杂交%肺泡巨噬细胞%钙调蛋白
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%Nsp9%酵母雙雜交%肺泡巨噬細胞%鈣調蛋白
저번식여호흡종합정병독%Nsp9%효모쌍잡교%폐포거서세포%개조단백
porcine reproductive and respiratory syndrome virus%Nsp9%yeast two-hybrid system%PAM%CaM
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)非结构蛋白Nsp9为该病毒RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp),在病毒的转录复制过程中发挥关键性作用.为筛选与Nsp9相互作用的宿主蛋白,本研究采用酵母双杂交方法,以PRRSV Nsp9为诱饵蛋白,从猪肺泡巨噬细胞(PAM)酵母表达cDNA文库中筛选到CALM2 (Calmodulin 2)基因.酵母回返验证试验和免疫共沉淀(Co-IP)试验证明CALM2基因编码的钙调蛋白(CaM)与Nsp9特异地相互作用.激光共聚焦试验表明CaM与Nsp9共定位于HEK293细胞胞浆内.本研究筛选到一个与Nsp9相互作用的新宿主蛋白CaM,但该蛋白是否直接参与PRRSV的复制过程还有待进一步研究.
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)非結構蛋白Nsp9為該病毒RNA依賴的RNA聚閤酶(RdRp),在病毒的轉錄複製過程中髮揮關鍵性作用.為篩選與Nsp9相互作用的宿主蛋白,本研究採用酵母雙雜交方法,以PRRSV Nsp9為誘餌蛋白,從豬肺泡巨噬細胞(PAM)酵母錶達cDNA文庫中篩選到CALM2 (Calmodulin 2)基因.酵母迴返驗證試驗和免疫共沉澱(Co-IP)試驗證明CALM2基因編碼的鈣調蛋白(CaM)與Nsp9特異地相互作用.激光共聚焦試驗錶明CaM與Nsp9共定位于HEK293細胞胞漿內.本研究篩選到一箇與Nsp9相互作用的新宿主蛋白CaM,但該蛋白是否直接參與PRRSV的複製過程還有待進一步研究.
저번식여호흡종합정병독(PRRSV)비결구단백Nsp9위해병독RNA의뢰적RNA취합매(RdRp),재병독적전록복제과정중발휘관건성작용.위사선여Nsp9상호작용적숙주단백,본연구채용효모쌍잡교방법,이PRRSV Nsp9위유이단백,종저폐포거서세포(PAM)효모표체cDNA문고중사선도CALM2 (Calmodulin 2)기인.효모회반험증시험화면역공침정(Co-IP)시험증명CALM2기인편마적개조단백(CaM)여Nsp9특이지상호작용.격광공취초시험표명CaM여Nsp9공정위우HEK293세포포장내.본연구사선도일개여Nsp9상호작용적신숙주단백CaM,단해단백시부직접삼여PRRSV적복제과정환유대진일보연구.
