分析化学
分析化學
분석화학
Chinese Journal of Analytical Chemistry
2015年
8期
1169-1174
,共6页
王洪彬%杨泓喆%杨霁菡%王永帅%路福平
王洪彬%楊泓喆%楊霽菡%王永帥%路福平
왕홍빈%양홍철%양제함%왕영수%로복평
代谢组学%枯草芽孢杆菌%气相色谱-质谱联用%前处理
代謝組學%枯草芽孢桿菌%氣相色譜-質譜聯用%前處理
대사조학%고초아포간균%기상색보-질보련용%전처리
Metabolomics%Bacillus Subtilis%Gas chromatography-mass spectrometry%Pretreatment
本研究比较了不同淬灭剂(甲醇、60％甲醇、60％甲醇-0.9％ NaCl、60％甲醇-0.9％(NH4)2CO3和60％甲醇-0.9％ NaAc)条件下胞内物质核酸、蛋白质和代谢物的渗漏情况,发现60％甲醇-0.9％(NH4) 2CO3和60％甲醇-0.9％ NaAc渗漏最少;比较了珠磨法、液氮研磨法、超声破碎3种细胞破碎方法条件下代谢物的提取效果,发现珠磨法提取效果最佳;比较了不同衍生时间(0.5～2.5 h)下代谢物相对丰度的变化,发现衍生时间达到2.0h后,代谢物丰度不再有显著变化.最终确定了枯草芽孢杆菌代谢组样品最适前处理方法:预冷的60％甲醇-0.9％ (NH4)2CO3淬灭,珠磨法破碎细胞,细胞破碎物用O-Bis[三甲基硅烷]三氟乙酸盐(MSTFA)衍生2h.采用本方法从枯草芽孢杆菌中共鉴定到223种代谢物,包括大量氨基酸、有机酸和糖类物质.本研究为枯草芽孢杆菌的代谢组学研究提供了基础.
本研究比較瞭不同淬滅劑(甲醇、60％甲醇、60％甲醇-0.9％ NaCl、60％甲醇-0.9％(NH4)2CO3和60％甲醇-0.9％ NaAc)條件下胞內物質覈痠、蛋白質和代謝物的滲漏情況,髮現60％甲醇-0.9％(NH4) 2CO3和60％甲醇-0.9％ NaAc滲漏最少;比較瞭珠磨法、液氮研磨法、超聲破碎3種細胞破碎方法條件下代謝物的提取效果,髮現珠磨法提取效果最佳;比較瞭不同衍生時間(0.5～2.5 h)下代謝物相對豐度的變化,髮現衍生時間達到2.0h後,代謝物豐度不再有顯著變化.最終確定瞭枯草芽孢桿菌代謝組樣品最適前處理方法:預冷的60％甲醇-0.9％ (NH4)2CO3淬滅,珠磨法破碎細胞,細胞破碎物用O-Bis[三甲基硅烷]三氟乙痠鹽(MSTFA)衍生2h.採用本方法從枯草芽孢桿菌中共鑒定到223種代謝物,包括大量氨基痠、有機痠和糖類物質.本研究為枯草芽孢桿菌的代謝組學研究提供瞭基礎.
본연구비교료불동쉬멸제(갑순、60％갑순、60％갑순-0.9％ NaCl、60％갑순-0.9％(NH4)2CO3화60％갑순-0.9％ NaAc)조건하포내물질핵산、단백질화대사물적삼루정황,발현60％갑순-0.9％(NH4) 2CO3화60％갑순-0.9％ NaAc삼루최소;비교료주마법、액담연마법、초성파쇄3충세포파쇄방법조건하대사물적제취효과,발현주마법제취효과최가;비교료불동연생시간(0.5～2.5 h)하대사물상대봉도적변화,발현연생시간체도2.0h후,대사물봉도불재유현저변화.최종학정료고초아포간균대사조양품최괄전처리방법:예랭적60％갑순-0.9％ (NH4)2CO3쉬멸,주마법파쇄세포,세포파쇄물용O-Bis[삼갑기규완]삼불을산염(MSTFA)연생2h.채용본방법종고초아포간균중공감정도223충대사물,포괄대량안기산、유궤산화당류물질.본연구위고초아포간균적대사조학연구제공료기출.
