成都医学院学报
成都醫學院學報
성도의학원학보
Journal of Chengdu Medical College
2015年
4期
404-409
,共6页
魏子龙%赵耀东%黄强%任力%沙龙贵
魏子龍%趙耀東%黃彊%任力%沙龍貴
위자룡%조요동%황강%임력%사룡귀
胶质瘤干祖细胞%细胞分化%自噬%3-甲基腺嘌呤%雷帕霉素
膠質瘤榦祖細胞%細胞分化%自噬%3-甲基腺嘌呤%雷帕黴素
효질류간조세포%세포분화%자서%3-갑기선표령%뢰파매소
Glioma stem/progenitor cells%Cell differentiation%Autophagy%3-methyladenine%Rapamycin
目的 观察胶质瘤干祖细胞(GSPCs)诱导分化前后自噬活性的变化,探讨GSPCs分化与自噬的相关性.方法 于干细胞培养基和诱导分化培养基培养GSPCs,分别采用微管相关蛋白轻链3(LC3)免疫荧光染色、透射电镜及Western blot检测GSPCs分化前后自噬活性的变化.GSPCs诱导分化时,加入3-甲基腺嘌呤(3-MA)自噬抑制剂,观察其对GSPCs分化的影响,并采用自噬激活剂雷帕霉素(RPM)行进一步检测.结果 GSPCs分化前,自噬活性低;诱导其分化后,自噬活性增高.加入自噬抑制剂3-MA可抑制GSPCs贴壁分化;Western blot检测示,加入3-MA的GSPCs中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、微管相关蛋白-2(MAP-2)及beclin-1表达量显著低于未加3-MA的GSPCs.GSPCs在含血清条件下培养时,适当浓度的RPM可促进其贴壁分化.结论 GSPCs分化与其自噬活性密切相关.增强GSPCs自噬活性可促进分化,抑制其自噬活性可抑制分化.
目的 觀察膠質瘤榦祖細胞(GSPCs)誘導分化前後自噬活性的變化,探討GSPCs分化與自噬的相關性.方法 于榦細胞培養基和誘導分化培養基培養GSPCs,分彆採用微管相關蛋白輕鏈3(LC3)免疫熒光染色、透射電鏡及Western blot檢測GSPCs分化前後自噬活性的變化.GSPCs誘導分化時,加入3-甲基腺嘌呤(3-MA)自噬抑製劑,觀察其對GSPCs分化的影響,併採用自噬激活劑雷帕黴素(RPM)行進一步檢測.結果 GSPCs分化前,自噬活性低;誘導其分化後,自噬活性增高.加入自噬抑製劑3-MA可抑製GSPCs貼壁分化;Western blot檢測示,加入3-MA的GSPCs中膠質纖維痠性蛋白(GFAP)、微管相關蛋白-2(MAP-2)及beclin-1錶達量顯著低于未加3-MA的GSPCs.GSPCs在含血清條件下培養時,適噹濃度的RPM可促進其貼壁分化.結論 GSPCs分化與其自噬活性密切相關.增彊GSPCs自噬活性可促進分化,抑製其自噬活性可抑製分化.
목적 관찰효질류간조세포(GSPCs)유도분화전후자서활성적변화,탐토GSPCs분화여자서적상관성.방법 우간세포배양기화유도분화배양기배양GSPCs,분별채용미관상관단백경련3(LC3)면역형광염색、투사전경급Western blot검측GSPCs분화전후자서활성적변화.GSPCs유도분화시,가입3-갑기선표령(3-MA)자서억제제,관찰기대GSPCs분화적영향,병채용자서격활제뢰파매소(RPM)행진일보검측.결과 GSPCs분화전,자서활성저;유도기분화후,자서활성증고.가입자서억제제3-MA가억제GSPCs첩벽분화;Western blot검측시,가입3-MA적GSPCs중효질섬유산성단백(GFAP)、미관상관단백-2(MAP-2)급beclin-1표체량현저저우미가3-MA적GSPCs.GSPCs재함혈청조건하배양시,괄당농도적RPM가촉진기첩벽분화.결론 GSPCs분화여기자서활성밀절상관.증강GSPCs자서활성가촉진분화,억제기자서활성가억제분화.
