内科急危重症杂志
內科急危重癥雜誌
내과급위중증잡지
Journal of Internal Intensive Medicine
2015年
4期
308-311
,共4页
Survivin%siRNA%H1299细胞%凋亡
Survivin%siRNA%H1299細胞%凋亡
Survivin%siRNA%H1299세포%조망
Survivin%siRNA%H1299 cell%Apoptosis
目的:研究RNAi技术沉默Survivin基因对人肺癌细胞株H1299增殖和凋亡的影响.方法:将Survivin特异性siRNA表达载体siRNA-Sur转染H1299细胞,利用倒置荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率,通过Western blot和Realtime-PCR方法检测RNAi沉默Survivin基因表达的效果,MTT法检测RNAi沉默Survivin基因对基因H1299细胞增殖的影响,采用流式细胞术分析细胞周期分布和凋亡.结果:siRNA-Sur转染H1299细胞48 h后,细胞的Survivin基因表达明显减少,空白对照组Survivin mRNA的相对表达量为1.0,siRNA-空白对照组为0.98,而siR-NA-Sur组为0.32(P ＜0.01);导致H1299细胞G2期阻滞,空白对照组为23.7％,而siRNA-Sur组为50.1％(P＜0.01);细胞抑制率和凋亡率增加,转染48 h,空白对照组凋亡率为5.8％,无关对照组为6.2％,而siRNA-Sur组达50.6％ (P ＜0.01).结论:RNAi沉默H1299细胞Survivin基因表达抑制细胞增殖,并诱导H1299细胞凋亡.
目的:研究RNAi技術沉默Survivin基因對人肺癌細胞株H1299增殖和凋亡的影響.方法:將Survivin特異性siRNA錶達載體siRNA-Sur轉染H1299細胞,利用倒置熒光顯微鏡和流式細胞儀檢測轉染效率,通過Western blot和Realtime-PCR方法檢測RNAi沉默Survivin基因錶達的效果,MTT法檢測RNAi沉默Survivin基因對基因H1299細胞增殖的影響,採用流式細胞術分析細胞週期分佈和凋亡.結果:siRNA-Sur轉染H1299細胞48 h後,細胞的Survivin基因錶達明顯減少,空白對照組Survivin mRNA的相對錶達量為1.0,siRNA-空白對照組為0.98,而siR-NA-Sur組為0.32(P ＜0.01);導緻H1299細胞G2期阻滯,空白對照組為23.7％,而siRNA-Sur組為50.1％(P＜0.01);細胞抑製率和凋亡率增加,轉染48 h,空白對照組凋亡率為5.8％,無關對照組為6.2％,而siRNA-Sur組達50.6％ (P ＜0.01).結論:RNAi沉默H1299細胞Survivin基因錶達抑製細胞增殖,併誘導H1299細胞凋亡.
목적:연구RNAi기술침묵Survivin기인대인폐암세포주H1299증식화조망적영향.방법:장Survivin특이성siRNA표체재체siRNA-Sur전염H1299세포,이용도치형광현미경화류식세포의검측전염효솔,통과Western blot화Realtime-PCR방법검측RNAi침묵Survivin기인표체적효과,MTT법검측RNAi침묵Survivin기인대기인H1299세포증식적영향,채용류식세포술분석세포주기분포화조망.결과:siRNA-Sur전염H1299세포48 h후,세포적Survivin기인표체명현감소,공백대조조Survivin mRNA적상대표체량위1.0,siRNA-공백대조조위0.98,이siR-NA-Sur조위0.32(P ＜0.01);도치H1299세포G2기조체,공백대조조위23.7％,이siRNA-Sur조위50.1％(P＜0.01);세포억제솔화조망솔증가,전염48 h,공백대조조조망솔위5.8％,무관대조조위6.2％,이siRNA-Sur조체50.6％ (P ＜0.01).결론:RNAi침묵H1299세포Survivin기인표체억제세포증식,병유도H1299세포조망.
