浙江理工大学学报（自然科学版）
浙江理工大學學報（自然科學版）
절강리공대학학보（자연과학판）
Journal of Zhejiang Institute of Science and Technology
2015年
5期
712-717
,共6页
崔磊%黎江%刘辉%吴红平%李林芳%郝方元%金华君%钱其军
崔磊%黎江%劉輝%吳紅平%李林芳%郝方元%金華君%錢其軍
최뢰%려강%류휘%오홍평%리림방%학방원%금화군%전기군
CD47%T细胞%腺病毒%肝癌
CD47%T細胞%腺病毒%肝癌
CD47%T세포%선병독%간암
CD47%T cell%adenovirus%liver cancer
探讨携带SIRPα-Fc(SF)融合基因蛋白基因的重组腺病毒Ad35-SF感染T细胞后对T细胞功能的影响.腺病毒Ad35-SF感染Jurkat T细胞后,通过Western blotting及ELISA方法检测细胞上清中SF融合蛋白的大小与表达量;通过流式分析技术检测细胞表面CD47的封闭情况;通过CCK8方法检测细胞的增殖与对肿瘤细胞的杀伤作用.结果表明,Ad35-SF构建成功,其感染Jurkat T细胞后,能在其内表达并分泌产生大小约为48 kD的SF蛋白,细胞上清中SF的表达量可到达19.1 μg/mL.Ad35-SF(MOI=1)感染Jurkat细胞18 h后,细胞CD47阳性比例从97.06％下降到15.32％;当Ad35-SF感染复数增加至5,10时,CD47阳性比率进一步降低至2.94％和1.73％.相对于空病毒对照组,Ad35-SF感染Jurkat细胞48 h后其增殖效果提高了29％,对肝癌细胞株Hep 3B的杀伤作用提升25.6％(p＜0.01).结果表明构建的重组腺病毒Ad35-SF能有效感染Jurkat细胞并在其内表达分泌SF蛋白,封闭细胞表面的CD47,同时显著提高Jurkat细胞的增殖能力和对肝癌细胞的杀伤作用.
探討攜帶SIRPα-Fc(SF)融閤基因蛋白基因的重組腺病毒Ad35-SF感染T細胞後對T細胞功能的影響.腺病毒Ad35-SF感染Jurkat T細胞後,通過Western blotting及ELISA方法檢測細胞上清中SF融閤蛋白的大小與錶達量;通過流式分析技術檢測細胞錶麵CD47的封閉情況;通過CCK8方法檢測細胞的增殖與對腫瘤細胞的殺傷作用.結果錶明,Ad35-SF構建成功,其感染Jurkat T細胞後,能在其內錶達併分泌產生大小約為48 kD的SF蛋白,細胞上清中SF的錶達量可到達19.1 μg/mL.Ad35-SF(MOI=1)感染Jurkat細胞18 h後,細胞CD47暘性比例從97.06％下降到15.32％;噹Ad35-SF感染複數增加至5,10時,CD47暘性比率進一步降低至2.94％和1.73％.相對于空病毒對照組,Ad35-SF感染Jurkat細胞48 h後其增殖效果提高瞭29％,對肝癌細胞株Hep 3B的殺傷作用提升25.6％(p＜0.01).結果錶明構建的重組腺病毒Ad35-SF能有效感染Jurkat細胞併在其內錶達分泌SF蛋白,封閉細胞錶麵的CD47,同時顯著提高Jurkat細胞的增殖能力和對肝癌細胞的殺傷作用.
탐토휴대SIRPα-Fc(SF)융합기인단백기인적중조선병독Ad35-SF감염T세포후대T세포공능적영향.선병독Ad35-SF감염Jurkat T세포후,통과Western blotting급ELISA방법검측세포상청중SF융합단백적대소여표체량;통과류식분석기술검측세포표면CD47적봉폐정황;통과CCK8방법검측세포적증식여대종류세포적살상작용.결과표명,Ad35-SF구건성공,기감염Jurkat T세포후,능재기내표체병분비산생대소약위48 kD적SF단백,세포상청중SF적표체량가도체19.1 μg/mL.Ad35-SF(MOI=1)감염Jurkat세포18 h후,세포CD47양성비례종97.06％하강도15.32％;당Ad35-SF감염복수증가지5,10시,CD47양성비솔진일보강저지2.94％화1.73％.상대우공병독대조조,Ad35-SF감염Jurkat세포48 h후기증식효과제고료29％,대간암세포주Hep 3B적살상작용제승25.6％(p＜0.01).결과표명구건적중조선병독Ad35-SF능유효감염Jurkat세포병재기내표체분비SF단백,봉폐세포표면적CD47,동시현저제고Jurkat세포적증식능력화대간암세포적살상작용.
