宁夏医科大学学报
寧夏醫科大學學報
저하의과대학학보
Journal of Ningxia Medical University
2015年
7期
764-768,前插3
,共6页
人脐静脉平滑肌细胞%硫化氢%氧化应激%活性氧%丙二醛%血管钙化
人臍靜脈平滑肌細胞%硫化氫%氧化應激%活性氧%丙二醛%血管鈣化
인제정맥평활기세포%류화경%양화응격%활성양%병이철%혈관개화
human umbilical vein smooth muscle cells%hydrogen sulfide%oxidative stress%MDA%Ros%vascular calcification
目的 探讨外源性硫化氢减轻人脐静脉平滑肌细胞(HVSMCs)钙化的机制.方法 采用组织块重复贴壁法培养原代HVSMCs,经免疫细胞化学法鉴定后,将细胞随机分为对照组、高磷组(12mmol β-GP)、高磷+NaHS组(8.0×10-6 mol NaHS)、高糖组(25mmol D-葡糖糖)、高糖+NaHS组(8.0×10-6 mol NaHS).采用茜素红S染色法定性检测平滑肌细胞钙化程度;MTT法检测细胞存活率;比色法检测细胞内钙含量、碱性磷酸酶(ALP)活性、丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力;DCFH-DA荧光标记染色法检测细胞活性氧(ROS)水平.结果 MTT结果显示,与正常组相比,高磷和高糖均使细胞存活率下降(P均＜0.05),而加入NaHS干预的两组细胞存活率基本恢复至正常组水平.与正常组相比,高磷组和高糖组钙沉积明显增加,胞内钙含量、ALP活性显著升高(P＜0.05),氧化应激指标ROS增加、MDA含量升高(P＜0.05),而抗氧化应激指标T-SOD活力下降(P＜0.05).而分别加NaHS干预的两组细胞,与高磷组和高糖组相比钙沉积减轻,钙含量、ALP活性、ROS、MDA回升(P＜0.05),而T-SOD活力升高(P＜0.05).结论 外源性硫化氢部分通过对抗氧化应激而减轻血管平滑肌细胞钙化.
目的 探討外源性硫化氫減輕人臍靜脈平滑肌細胞(HVSMCs)鈣化的機製.方法 採用組織塊重複貼壁法培養原代HVSMCs,經免疫細胞化學法鑒定後,將細胞隨機分為對照組、高燐組(12mmol β-GP)、高燐+NaHS組(8.0×10-6 mol NaHS)、高糖組(25mmol D-葡糖糖)、高糖+NaHS組(8.0×10-6 mol NaHS).採用茜素紅S染色法定性檢測平滑肌細胞鈣化程度;MTT法檢測細胞存活率;比色法檢測細胞內鈣含量、堿性燐痠酶(ALP)活性、丙二醛(MDA)含量及總超氧化物歧化酶(T-SOD)活力;DCFH-DA熒光標記染色法檢測細胞活性氧(ROS)水平.結果 MTT結果顯示,與正常組相比,高燐和高糖均使細胞存活率下降(P均＜0.05),而加入NaHS榦預的兩組細胞存活率基本恢複至正常組水平.與正常組相比,高燐組和高糖組鈣沉積明顯增加,胞內鈣含量、ALP活性顯著升高(P＜0.05),氧化應激指標ROS增加、MDA含量升高(P＜0.05),而抗氧化應激指標T-SOD活力下降(P＜0.05).而分彆加NaHS榦預的兩組細胞,與高燐組和高糖組相比鈣沉積減輕,鈣含量、ALP活性、ROS、MDA迴升(P＜0.05),而T-SOD活力升高(P＜0.05).結論 外源性硫化氫部分通過對抗氧化應激而減輕血管平滑肌細胞鈣化.
목적 탐토외원성류화경감경인제정맥평활기세포(HVSMCs)개화적궤제.방법 채용조직괴중복첩벽법배양원대HVSMCs,경면역세포화학법감정후,장세포수궤분위대조조、고린조(12mmol β-GP)、고린+NaHS조(8.0×10-6 mol NaHS)、고당조(25mmol D-포당당)、고당+NaHS조(8.0×10-6 mol NaHS).채용천소홍S염색법정성검측평활기세포개화정도;MTT법검측세포존활솔;비색법검측세포내개함량、감성린산매(ALP)활성、병이철(MDA)함량급총초양화물기화매(T-SOD)활력;DCFH-DA형광표기염색법검측세포활성양(ROS)수평.결과 MTT결과현시,여정상조상비,고린화고당균사세포존활솔하강(P균＜0.05),이가입NaHS간예적량조세포존활솔기본회복지정상조수평.여정상조상비,고린조화고당조개침적명현증가,포내개함량、ALP활성현저승고(P＜0.05),양화응격지표ROS증가、MDA함량승고(P＜0.05),이항양화응격지표T-SOD활력하강(P＜0.05).이분별가NaHS간예적량조세포,여고린조화고당조상비개침적감경,개함량、ALP활성、ROS、MDA회승(P＜0.05),이T-SOD활력승고(P＜0.05).결론 외원성류화경부분통과대항양화응격이감경혈관평활기세포개화.
