华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
Journal of South China Agricultural University
2015年
5期
26-30
,共5页
刘志玲%吴晓薇%康伟%朱道中%刘中勇%陈增荣%郭霄峰
劉誌玲%吳曉薇%康偉%硃道中%劉中勇%陳增榮%郭霄峰
류지령%오효미%강위%주도중%류중용%진증영%곽소봉
荷斯坦牛%脊椎畸形综合征%TaqMan荧光PCR
荷斯坦牛%脊椎畸形綜閤徵%TaqMan熒光PCR
하사탄우%척추기형종합정%TaqMan형광PCR
Holstein cattle%complex vertebral malformation%TaqMan real-time PCR
[目的]建立快速筛查牛脊椎畸形综合征(Complex vertebral malformation,CVM)基因携带者的方法,在牛群中逐渐淘汰CVM基因携带者以减少养牛业损失.[方法]根据GenBank已发表的CVM基因的SLC35A3基因序列,设计合成了2对特异性引物和2条TaqMan探针,建立了牛脊椎畸形综合征TaqMan探针检测方法.对方法的特异性和敏感性进行分析后,应用该方法对临床样本进行检测,并与测序方法进行比较.[结果和结论]该方法能有效区分突变型、野生型和杂合型个体.各种基因型的检测灵敏度为:突变型质粒拷贝数1×103 μL-1,杂合型质粒拷贝数1×104 μL-1,野生型质粒拷贝数5×103 μL-1.从292份荷斯坦牛全血中检出6份CVM基因携带者,与测序方法结果一致.本研究建立的方法简便快捷、准确率高,适合大样本筛选和口岸现场快速筛查.
[目的]建立快速篩查牛脊椎畸形綜閤徵(Complex vertebral malformation,CVM)基因攜帶者的方法,在牛群中逐漸淘汰CVM基因攜帶者以減少養牛業損失.[方法]根據GenBank已髮錶的CVM基因的SLC35A3基因序列,設計閤成瞭2對特異性引物和2條TaqMan探針,建立瞭牛脊椎畸形綜閤徵TaqMan探針檢測方法.對方法的特異性和敏感性進行分析後,應用該方法對臨床樣本進行檢測,併與測序方法進行比較.[結果和結論]該方法能有效區分突變型、野生型和雜閤型箇體.各種基因型的檢測靈敏度為:突變型質粒拷貝數1×103 μL-1,雜閤型質粒拷貝數1×104 μL-1,野生型質粒拷貝數5×103 μL-1.從292份荷斯坦牛全血中檢齣6份CVM基因攜帶者,與測序方法結果一緻.本研究建立的方法簡便快捷、準確率高,適閤大樣本篩選和口岸現場快速篩查.
[목적]건립쾌속사사우척추기형종합정(Complex vertebral malformation,CVM)기인휴대자적방법,재우군중축점도태CVM기인휴대자이감소양우업손실.[방법]근거GenBank이발표적CVM기인적SLC35A3기인서렬,설계합성료2대특이성인물화2조TaqMan탐침,건립료우척추기형종합정TaqMan탐침검측방법.대방법적특이성화민감성진행분석후,응용해방법대림상양본진행검측,병여측서방법진행비교.[결과화결론]해방법능유효구분돌변형、야생형화잡합형개체.각충기인형적검측령민도위:돌변형질립고패수1×103 μL-1,잡합형질립고패수1×104 μL-1,야생형질립고패수5×103 μL-1.종292빈하사탄우전혈중검출6빈CVM기인휴대자,여측서방법결과일치.본연구건립적방법간편쾌첩、준학솔고,괄합대양본사선화구안현장쾌속사사.
