CAJ | 학술논문

目的探讨二甲双胍激活AMPK对高糖诱发的血管内皮细胞氧化应激过程的影响.方法高糖培养诱导人主动脉内皮细胞HAEC氧化应激,用AMPK激动剂5-氨基咪唑-4-甲酰胺-l-B-呋喃核糖苷(AICAR,2 mmol/L)和二甲双胍(metformin,2 mmol/L)进行干预,分别用Western blot和免疫荧光检测内皮细胞AMPK/T-172磷酸化蛋白表达水平及细胞内氧化应激相关蛋白p47phox和p67phox的表达.雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(NC,n=10)、链脲菌素诱导糖尿病模型组(DM,n=10)和二甲双胍干预糖尿病模型组(MT,n=10),造模成功后MT组经饮水给予二甲双胍50 mg/(kg/d),NC组、DM组给予正常饮水.期间定期测定小鼠体重,并检测各阶段血糖.二甲双胍干预一周后处死小鼠,取主动脉做免疫组化观察血管内皮细胞的氧化应激状态.结果在内皮细胞中二甲双胍可通过激活AMPK来抑制NADPH氧化酶胞质内亚基p47phox和p67Phox的表达.动物实验显示,与糖尿病模型组小鼠相比,二甲双胍干预组小鼠血糖降低,体重增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).免疫组化分析显示,小鼠主动脉血管内皮细胞的氧化应激标志性产物3-NT(3-nitrotyrosine),MDA(malondialdehyde)和HNE(4-hydroxy-2-nonenal)的水平均明显降低.结论二甲双胍可通过激活AMPK来缓解内皮细胞中出现的氧化应激,可能对糖尿病血管并发症具有预防和治疗作用.
목적 탐토이갑쌍고격활AMPK대고당유발적혈관내피세포양화응격과정적영향.방법 고당배양유도인주동맥내피세포HAEC양화응격,용AMPK격동제5-안기미서-4-갑선알-l-B-부남핵당감(AICAR,2 mmol/L)화이갑쌍고(metformin,2 mmol/L)진행간예,분별용Western blot화면역형광검측내피세포AMPK/T-172린산화단백표체수평급세포내양화응격상관단백p47phox화p67phox적표체.웅성C57BL/6소서수궤분위정상대조조(NC,n=10)、련뇨균소유도당뇨병모형조(DM,n=10)화이갑쌍고간예당뇨병모형조(MT,n=10),조모성공후MT조경음수급여이갑쌍고50 mg/(kg/d),NC조、DM조급여정상음수.기간정기측정소서체중,병검측각계단혈당.이갑쌍고간예일주후처사소서,취주동맥주면역조화관찰혈관내피세포적양화응격상태.결과 재내피세포중이갑쌍고가통과격활AMPK래억제NADPH양화매포질내아기p47phox화p67Phox적표체.동물실험현시,여당뇨병모형조소서상비,이갑쌍고간예조소서혈당강저,체중증가,차이균유통계학의의(P＜0.05).면역조화분석현시,소서주동맥혈관내피세포적양화응격표지성산물3-NT(3-nitrotyrosine),MDA(malondialdehyde)화HNE(4-hydroxy-2-nonenal)적수평균명현강저.결론 이갑쌍고가통과격활AMPK래완해내피세포중출현적양화응격,가능대당뇨병혈관병발증구유예방화치료작용.