广东药学院学报
廣東藥學院學報
엄동약학원학보
Journal of Guangdong Pharmaceutical University
2015年
4期
518-521
,共4页
韩福平%陈耀旭%苏浩%吕南英%殷春霞%黄礼杰%谭文
韓福平%陳耀旭%囌浩%呂南英%慇春霞%黃禮傑%譚文
한복평%진요욱%소호%려남영%은춘하%황례걸%담문
成年大鼠%心室肌细胞%分离%原代培养
成年大鼠%心室肌細胞%分離%原代培養
성년대서%심실기세포%분리%원대배양
adult SD rat%ventricular myocytes%isolation%primary culture
目的 建立稳定高效的成年大鼠心室肌细胞分离与培养方法.方法 成年SD大鼠麻醉后,迅速开胸取心,将主动脉连接于Langendorff装置上进行逆向灌流,用0.8 mg/mL Ⅱ型胶原酶和0.1 mg/mL蛋白酶双酶灌注消化分离心肌细胞,采用自然沉降法纯化心室肌细胞,一部分细胞用改良的M199培养基进行细胞培养,另一部分使用台盼蓝染色进行细胞活性检测并计数,同时使用激光共聚焦显微镜观察细胞收缩及钙瞬变.结果 本方法可获得(81.9±2.2)％具有活性的成年大鼠心室肌细胞,每只SD大鼠心脏的细胞产量可达(2.0±0.1)×107个,电刺激时细胞同步稳定收缩.结论 该分离和培养方法高效、稳定,分离出的细胞活性高,产量高,可用于原代培养.
目的 建立穩定高效的成年大鼠心室肌細胞分離與培養方法.方法 成年SD大鼠痳醉後,迅速開胸取心,將主動脈連接于Langendorff裝置上進行逆嚮灌流,用0.8 mg/mL Ⅱ型膠原酶和0.1 mg/mL蛋白酶雙酶灌註消化分離心肌細胞,採用自然沉降法純化心室肌細胞,一部分細胞用改良的M199培養基進行細胞培養,另一部分使用檯盼藍染色進行細胞活性檢測併計數,同時使用激光共聚焦顯微鏡觀察細胞收縮及鈣瞬變.結果 本方法可穫得(81.9±2.2)％具有活性的成年大鼠心室肌細胞,每隻SD大鼠心髒的細胞產量可達(2.0±0.1)×107箇,電刺激時細胞同步穩定收縮.結論 該分離和培養方法高效、穩定,分離齣的細胞活性高,產量高,可用于原代培養.
목적 건립은정고효적성년대서심실기세포분리여배양방법.방법 성년SD대서마취후,신속개흉취심,장주동맥련접우Langendorff장치상진행역향관류,용0.8 mg/mL Ⅱ형효원매화0.1 mg/mL단백매쌍매관주소화분리심기세포,채용자연침강법순화심실기세포,일부분세포용개량적M199배양기진행세포배양,령일부분사용태반람염색진행세포활성검측병계수,동시사용격광공취초현미경관찰세포수축급개순변.결과 본방법가획득(81.9±2.2)％구유활성적성년대서심실기세포,매지SD대서심장적세포산량가체(2.0±0.1)×107개,전자격시세포동보은정수축.결론 해분리화배양방법고효、은정,분리출적세포활성고,산량고,가용우원대배양.
