食品科学
食品科學
식품과학
Food Science
2015年
15期
142-146
,共5页
崔昱清%王复龙%崔保威%郭秀云%李君珂%刘世欣%刘森轩%彭增起
崔昱清%王複龍%崔保威%郭秀雲%李君珂%劉世訢%劉森軒%彭增起
최욱청%왕복룡%최보위%곽수운%리군가%류세흔%류삼헌%팽증기
组织蛋白酶L%牛胰脏%纯化%酶学特性
組織蛋白酶L%牛胰髒%純化%酶學特性
조직단백매L%우이장%순화%매학특성
cathepsin L%bovine pancreas%purification%enzymatic characterization
新鲜牛胰脏匀浆物经酸化粗提后,再通过盐析、柱层析等步骤纯化,制备了0.58 mg纯酶,纯化倍数达530.54.经凝胶电泳分析,该酶有2个亚基,分子质量为29.1 kD和18.9 kD.牛胰脏组织蛋白酶L的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为6.5.巯基还原剂二硫苏糖醇、L-半胱氨酸均明显激活了该酶活性,10 μmol/L的N-(反式-环氧丁二酰基)-L-亮氨酸-4-胍基丁基酰胺(E-64)可完全抑制其活性.1mmol/L的Zn2+对酶活性有明显抑制作用.该纯化酶可水解苄氧羰基-苯丙氨酰-精氨酰-甲基香豆素(Z-Phe-Arg-MCA),其Km值为3.52 μmol/L.
新鮮牛胰髒勻漿物經痠化粗提後,再通過鹽析、柱層析等步驟純化,製備瞭0.58 mg純酶,純化倍數達530.54.經凝膠電泳分析,該酶有2箇亞基,分子質量為29.1 kD和18.9 kD.牛胰髒組織蛋白酶L的最適反應溫度為50℃,最適反應pH值為6.5.巰基還原劑二硫囌糖醇、L-半胱氨痠均明顯激活瞭該酶活性,10 μmol/L的N-(反式-環氧丁二酰基)-L-亮氨痠-4-胍基丁基酰胺(E-64)可完全抑製其活性.1mmol/L的Zn2+對酶活性有明顯抑製作用.該純化酶可水解芐氧羰基-苯丙氨酰-精氨酰-甲基香豆素(Z-Phe-Arg-MCA),其Km值為3.52 μmol/L.
신선우이장균장물경산화조제후,재통과염석、주층석등보취순화,제비료0.58 mg순매,순화배수체530.54.경응효전영분석,해매유2개아기,분자질량위29.1 kD화18.9 kD.우이장조직단백매L적최괄반응온도위50℃,최괄반응pH치위6.5.구기환원제이류소당순、L-반광안산균명현격활료해매활성,10 μmol/L적N-(반식-배양정이선기)-L-량안산-4-고기정기선알(E-64)가완전억제기활성.1mmol/L적Zn2+대매활성유명현억제작용.해순화매가수해변양탄기-분병안선-정안선-갑기향두소(Z-Phe-Arg-MCA),기Km치위3.52 μmol/L.
