食品科学
食品科學
식품과학
Food Science
2015年
15期
151-156
,共6页
鸭肝%乳酸脱氢酶%分离纯化%性质
鴨肝%乳痠脫氫酶%分離純化%性質
압간%유산탈경매%분리순화%성질
duck liver%lactate dehydrogenase%isolation and purification%characterization
新鲜鸭肝经匀浆、磷酸盐缓冲液抽提,乙醇和硫酸铵分级沉淀,DEAE-Sepharose离子交换层析及Superdex-200凝胶过滤层析,获得电泳纯的乳酸脱氢酶.该酶经纯化后酶比活力达到668.82 U/mg,酶活回收率为25.79％,纯化倍数为185.78.该酶的全分子质量约为170.93kD,亚基分子质量为44.72 kD;最适反应温度为45℃,最适pH值为7.4,在25～45℃及pH 5～10的范围内稳定性较好;在45℃、pH 7.4条件下,测得该酶对底物还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced form of nicotinamide-adenine dinucleotid,NADH)的Km值为3.407 μmol/L,对丙酮酸钠的Km值为8.431 μmol/L;草酸、十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)、Cu2+、Ag+对该酶的抑制作用最强,C02+、K+对该酶有双重作用,低浓度时有激活作用,而高浓度时具有抑制酶活性的作用.
新鮮鴨肝經勻漿、燐痠鹽緩遲液抽提,乙醇和硫痠銨分級沉澱,DEAE-Sepharose離子交換層析及Superdex-200凝膠過濾層析,穫得電泳純的乳痠脫氫酶.該酶經純化後酶比活力達到668.82 U/mg,酶活迴收率為25.79％,純化倍數為185.78.該酶的全分子質量約為170.93kD,亞基分子質量為44.72 kD;最適反應溫度為45℃,最適pH值為7.4,在25～45℃及pH 5～10的範圍內穩定性較好;在45℃、pH 7.4條件下,測得該酶對底物還原型煙酰胺腺嘌呤二覈苷痠(reduced form of nicotinamide-adenine dinucleotid,NADH)的Km值為3.407 μmol/L,對丙酮痠鈉的Km值為8.431 μmol/L;草痠、十二烷基硫痠鈉(sodium dodecyl sulfate,SDS)、Cu2+、Ag+對該酶的抑製作用最彊,C02+、K+對該酶有雙重作用,低濃度時有激活作用,而高濃度時具有抑製酶活性的作用.
신선압간경균장、린산염완충액추제,을순화류산안분급침정,DEAE-Sepharose리자교환층석급Superdex-200응효과려층석,획득전영순적유산탈경매.해매경순화후매비활력체도668.82 U/mg,매활회수솔위25.79％,순화배수위185.78.해매적전분자질량약위170.93kD,아기분자질량위44.72 kD;최괄반응온도위45℃,최괄pH치위7.4,재25～45℃급pH 5～10적범위내은정성교호;재45℃、pH 7.4조건하,측득해매대저물환원형연선알선표령이핵감산(reduced form of nicotinamide-adenine dinucleotid,NADH)적Km치위3.407 μmol/L,대병동산납적Km치위8.431 μmol/L;초산、십이완기류산납(sodium dodecyl sulfate,SDS)、Cu2+、Ag+대해매적억제작용최강,C02+、K+대해매유쌍중작용,저농도시유격활작용,이고농도시구유억제매활성적작용.
