实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
Practical Preventive Medicine
2015年
8期
905-908
,共4页
邱亚群%扈庆华%石晓路%李迎慧%林一曼%江敏
邱亞群%扈慶華%石曉路%李迎慧%林一曼%江敏
구아군%호경화%석효로%리영혜%림일만%강민
食源性致病菌%实时荧光PCR%HAND系统%多色探针编码技术
食源性緻病菌%實時熒光PCR%HAND繫統%多色探針編碼技術
식원성치병균%실시형광PCR%HAND계통%다색탐침편마기술
Foodborne pathogens%Real-time PCR%HAND system%Multicolor Combinational Probe Coding (MCPC)
目的 建立高效、特异、简便、快速的四重实时荧光PCR(real-time PCR)检测体系同时检测沙门菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠杆菌O157:H74种常见的主要食源性致病菌. 方法 从GenBank数据库中下载沙门菌侵袭性基因ssaR、金黄色葡萄球菌肠毒素nuc基因、单增李斯特菌的hlyA基因、大肠杆菌O157∶H7的rfbE基因序列,设计引物和探针,利用HAND系统和多色探针编码技术,通过对PCR反应的组分和条件进行优化,建立针对肉类食品中4种食源性致病菌四重实时荧光PCR体系. 结果 成功建立了检测肉类食品中4种食源性致病菌四重实时荧光体系,DNA和细菌纯培养的最低检测限达到1～100 fg/PCR和1～ 6.25 CFU/PCR,特异性均达98％以上. 结论 本文利用HAND系统和多色探针编码技术相结合,构建了针对4种食源性致病菌四重实时荧光PCR体系.可用于食品中食源性致病菌的快速筛查和食源性疾病暴发的快速诊断.
目的 建立高效、特異、簡便、快速的四重實時熒光PCR(real-time PCR)檢測體繫同時檢測沙門菌、金黃色葡萄毬菌、單覈細胞增生李斯特菌、大腸桿菌O157:H74種常見的主要食源性緻病菌. 方法 從GenBank數據庫中下載沙門菌侵襲性基因ssaR、金黃色葡萄毬菌腸毒素nuc基因、單增李斯特菌的hlyA基因、大腸桿菌O157∶H7的rfbE基因序列,設計引物和探針,利用HAND繫統和多色探針編碼技術,通過對PCR反應的組分和條件進行優化,建立針對肉類食品中4種食源性緻病菌四重實時熒光PCR體繫. 結果 成功建立瞭檢測肉類食品中4種食源性緻病菌四重實時熒光體繫,DNA和細菌純培養的最低檢測限達到1～100 fg/PCR和1～ 6.25 CFU/PCR,特異性均達98％以上. 結論 本文利用HAND繫統和多色探針編碼技術相結閤,構建瞭針對4種食源性緻病菌四重實時熒光PCR體繫.可用于食品中食源性緻病菌的快速篩查和食源性疾病暴髮的快速診斷.
목적 건립고효、특이、간편、쾌속적사중실시형광PCR(real-time PCR)검측체계동시검측사문균、금황색포도구균、단핵세포증생리사특균、대장간균O157:H74충상견적주요식원성치병균. 방법 종GenBank수거고중하재사문균침습성기인ssaR、금황색포도구균장독소nuc기인、단증리사특균적hlyA기인、대장간균O157∶H7적rfbE기인서렬,설계인물화탐침,이용HAND계통화다색탐침편마기술,통과대PCR반응적조분화조건진행우화,건립침대육류식품중4충식원성치병균사중실시형광PCR체계. 결과 성공건립료검측육류식품중4충식원성치병균사중실시형광체계,DNA화세균순배양적최저검측한체도1～100 fg/PCR화1～ 6.25 CFU/PCR,특이성균체98％이상. 결론 본문이용HAND계통화다색탐침편마기술상결합,구건료침대4충식원성치병균사중실시형광PCR체계.가용우식품중식원성치병균적쾌속사사화식원성질병폭발적쾌속진단.
