林业科技
林業科技
임업과기
Forestry Science & Technology
2015年
4期
1-5
,共5页
荣熔%陈蕤坤%田金华%魏佳佳%张静%徐莺
榮鎔%陳蕤坤%田金華%魏佳佳%張靜%徐鶯
영용%진유곤%전금화%위가가%장정%서앵
珙桐%愈伤组织ISSR%优化
珙桐%愈傷組織ISSR%優化
공동%유상조직ISSR%우화
采用改良的CTAB法提取珙桐愈伤组织DNA,通过单因素试验分析了退火温度、循环次数、模板用量、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶用量、引物浓度对珙桐愈伤组织ISSR-PCR扩增结果的影响.结果表明,适宜的珙桐愈伤组织ISSR-PCR扩增条件是:25μ1 PCR反应体积中,20 ng模板DNA,0.4mmol/LdNTP,1.0U Taq DNA聚合酶,0.8 μmol/L引物.最佳的扩增程序为:预变性94℃5min;变性94℃45 S,退火55.1℃45 S,延伸72℃2 min,共45个循环;后延伸72℃7min.
採用改良的CTAB法提取珙桐愈傷組織DNA,通過單因素試驗分析瞭退火溫度、循環次數、模闆用量、dNTP濃度、TaqDNA聚閤酶用量、引物濃度對珙桐愈傷組織ISSR-PCR擴增結果的影響.結果錶明,適宜的珙桐愈傷組織ISSR-PCR擴增條件是:25μ1 PCR反應體積中,20 ng模闆DNA,0.4mmol/LdNTP,1.0U Taq DNA聚閤酶,0.8 μmol/L引物.最佳的擴增程序為:預變性94℃5min;變性94℃45 S,退火55.1℃45 S,延伸72℃2 min,共45箇循環;後延伸72℃7min.
채용개량적CTAB법제취공동유상조직DNA,통과단인소시험분석료퇴화온도、순배차수、모판용량、dNTP농도、TaqDNA취합매용량、인물농도대공동유상조직ISSR-PCR확증결과적영향.결과표명,괄의적공동유상조직ISSR-PCR확증조건시:25μ1 PCR반응체적중,20 ng모판DNA,0.4mmol/LdNTP,1.0U Taq DNA취합매,0.8 μmol/L인물.최가적확증정서위:예변성94℃5min;변성94℃45 S,퇴화55.1℃45 S,연신72℃2 min,공45개순배;후연신72℃7min.
