中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
Chinese Journal of Zoonoses
2015年
8期
709-713
,共5页
金蕾%孙爱华%胡玮琳%葛玉梅%林旭瑷
金蕾%孫愛華%鬍瑋琳%葛玉梅%林旭璦
금뢰%손애화%호위림%갈옥매%림욱애
甲型副伤寒沙门菌%ompN基因%重组表达%抗原性%免疫保护性
甲型副傷寒沙門菌%ompN基因%重組錶達%抗原性%免疫保護性
갑형부상한사문균%ompN기인%중조표체%항원성%면역보호성
Salmonella paratyphi A%ompN gene%recombinant expression%antigenicity%immunoprotection
目的 了解甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白ompN基因携带率及其重组表达产物抗原性和免疫保护作用.方法 采用PCR扩增甲型副伤寒沙门菌参考标准株50001及126株临床菌株ompN基因并测序.构建ompN基因原核表达系统,Ni-NTA亲和层析法提取目的重组蛋白rOmpN.采用家兔免疫法和ELISA检测rOmpN免疫原性.微量肥达试验和激光共聚焦显微镜法分别检测OmpN在甲型副伤寒沙门菌株中表达率及其膜定位.采用小鼠感染模型了解rOmpN对甲型副伤寒沙门菌致死性感染的免疫保护作用.结果 所有甲型副伤寒沙门菌株中均扩增出全长ompN基因片段,其核苷酸和氨基酸序列相似性分别高达98.6％～99.9％和98.7％～100％.OmpN是甲型副伤寒沙门茵跨膜蛋白.ompN基因表达系统能表达rOmpN,免疫家兔后能产生高效价抗血清.98.2％(55/56)甲型副伤寒病人血清标本中rOmpN-IgG阳性,rOmpN兔抗血清能有效凝集甲型副伤寒沙门菌.100和200 μg rOmpN对感染小鼠的免疫保护率分别为60.0％(9/15)和73.3％(11/15).结论 甲型副伤寒沙门菌ompN基因分布广泛且序列保守,rOmpN有较强的抗原性和免疫保护作用.
目的 瞭解甲型副傷寒沙門菌外膜蛋白ompN基因攜帶率及其重組錶達產物抗原性和免疫保護作用.方法 採用PCR擴增甲型副傷寒沙門菌參攷標準株50001及126株臨床菌株ompN基因併測序.構建ompN基因原覈錶達繫統,Ni-NTA親和層析法提取目的重組蛋白rOmpN.採用傢兔免疫法和ELISA檢測rOmpN免疫原性.微量肥達試驗和激光共聚焦顯微鏡法分彆檢測OmpN在甲型副傷寒沙門菌株中錶達率及其膜定位.採用小鼠感染模型瞭解rOmpN對甲型副傷寒沙門菌緻死性感染的免疫保護作用.結果 所有甲型副傷寒沙門菌株中均擴增齣全長ompN基因片段,其覈苷痠和氨基痠序列相似性分彆高達98.6％～99.9％和98.7％～100％.OmpN是甲型副傷寒沙門茵跨膜蛋白.ompN基因錶達繫統能錶達rOmpN,免疫傢兔後能產生高效價抗血清.98.2％(55/56)甲型副傷寒病人血清標本中rOmpN-IgG暘性,rOmpN兔抗血清能有效凝集甲型副傷寒沙門菌.100和200 μg rOmpN對感染小鼠的免疫保護率分彆為60.0％(9/15)和73.3％(11/15).結論 甲型副傷寒沙門菌ompN基因分佈廣汎且序列保守,rOmpN有較彊的抗原性和免疫保護作用.
목적 료해갑형부상한사문균외막단백ompN기인휴대솔급기중조표체산물항원성화면역보호작용.방법 채용PCR확증갑형부상한사문균삼고표준주50001급126주림상균주ompN기인병측서.구건ompN기인원핵표체계통,Ni-NTA친화층석법제취목적중조단백rOmpN.채용가토면역법화ELISA검측rOmpN면역원성.미량비체시험화격광공취초현미경법분별검측OmpN재갑형부상한사문균주중표체솔급기막정위.채용소서감염모형료해rOmpN대갑형부상한사문균치사성감염적면역보호작용.결과 소유갑형부상한사문균주중균확증출전장ompN기인편단,기핵감산화안기산서렬상사성분별고체98.6％～99.9％화98.7％～100％.OmpN시갑형부상한사문인과막단백.ompN기인표체계통능표체rOmpN,면역가토후능산생고효개항혈청.98.2％(55/56)갑형부상한병인혈청표본중rOmpN-IgG양성,rOmpN토항혈청능유효응집갑형부상한사문균.100화200 μg rOmpN대감염소서적면역보호솔분별위60.0％(9/15)화73.3％(11/15).결론 갑형부상한사문균ompN기인분포엄범차서렬보수,rOmpN유교강적항원성화면역보호작용.
