CAJ | 학술논문

全基因组DNA甲基化分析是植物胁迫表观遗传损伤研究的主要方向之一,目前可用手段虽多,然而多数较繁琐,不利于表观遗传损伤的快速诊断.为此应用MSAP-PCR法研究Cd胁迫下拟南芥基因组甲基化变化,并通过优化实验条件、筛选引物(共5条,包括通用引物MLG2和本实验室设计引物AP-1、AP-2、AP-3、AP-4)以及检验多态性和敏感性,综合评估该方法在植物甲基化研究中的应用前景.研究结果发现:该方法模板量选择在150～250 ng并使用4％聚丙烯酰胺凝胶电泳(含50％尿素)分辨PCR产物多态性最佳;该方法对镉敏感性高,在0.2 mg·L-1Cd2+水平就可检测约30个位点的甲基化多态性;引物AP-4对CpG位点甲基化变化最敏感,而AP-3对CHG位点甲基化变化敏感性最高.该方法操作简便、成本低廉、结果准确且敏感性高,可作为植物全基因组甲基化研究的理想方法,以及植物抗逆研究和环境污染早期诊断的生物胁迫标记物.
전기인조DNA갑기화분석시식물협박표관유전손상연구적주요방향지일,목전가용수단수다,연이다수교번쇄,불리우표관유전손상적쾌속진단.위차응용MSAP-PCR법연구Cd협박하의남개기인조갑기화변화,병통과우화실험조건、사선인물(공5조,포괄통용인물MLG2화본실험실설계인물AP-1、AP-2、AP-3、AP-4)이급검험다태성화민감성,종합평고해방법재식물갑기화연구중적응용전경.연구결과발현:해방법모판량선택재150～250 ng병사용4％취병희선알응효전영(함50％뇨소)분변PCR산물다태성최가;해방법대력민감성고,재0.2 mg·L-1Cd2+수평취가검측약30개위점적갑기화다태성;인물AP-4대CpG위점갑기화변화최민감,이AP-3대CHG위점갑기화변화민감성최고.해방법조작간편、성본저렴、결과준학차민감성고,가작위식물전기인조갑기화연구적이상방법,이급식물항역연구화배경오염조기진단적생물협박표기물.