中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology
2015年
4期
545-551
,共7页
刘玲%李瑞芳%段冷昕%何玲
劉玲%李瑞芳%段冷昕%何玲
류령%리서방%단랭흔%하령
神经甾体%神经保护%细胞凋亡%硝普钠
神經甾體%神經保護%細胞凋亡%硝普鈉
신경치체%신경보호%세포조망%초보납
neurosteroids%neuroprotection%apoptosis%sodium nitroprusside
目的 探讨新型孕激素衍生物3α-羟基-3β-甲氧基甲基-16,17-亚甲基-孕甾-20-酮(CPU)对硝普钠(SNP)诱导的PC12细胞损伤的神经保护作用及其机制.方法 用终浓度为0.01,0.10,1.00 μmol· L-1的CPU预处理30 min,然后加入SNP共同作用24 h.采用MTT法检测细胞存活率,分光光度计法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化;流式细胞仪检测活性氧(ROS)、线粒体膜电位和细胞凋亡率;Western蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bax和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达水平.结果 与细胞对照组比较,SNP模型组PC12细胞的存活率显著降低,LDH的释放明显增加(P＜0.01),MDA生成增多,SOD活性降低,ROS水平升高,线粒体膜电位水平降低,细胞凋亡率由细胞对照组(1.20±0.14)％增加至(55.52±3.56)％(P＜0.01);Bcl-2蛋白表达降低,而Bax表达升高,Bax/Bcl-2比值升高,同时胱天蛋白酶3被激活(P＜0.01).与模型组比较,CPU 0.01,0.10和1.00μmol·L-1作用24 h后,细胞存活率显著升高,LDH的释放减少(P＜0.01),MDA的生成量减少,SOD活性增加,ROS累积减少,线粒体膜电位水平升高(P＜0.01);凋亡细胞分别降至(37.79±4.85)％,(22.31±4.25)％和(10.39±2.65)％;Bcl-2蛋白表达增加,Bax和活化的胱天蛋白酶3表达降低.结论 CPU对SNP所致损伤的PC12细胞有一定的保护作用,其作用机制可能与其抗氧化和抗凋亡作用有关.
目的 探討新型孕激素衍生物3α-羥基-3β-甲氧基甲基-16,17-亞甲基-孕甾-20-酮(CPU)對硝普鈉(SNP)誘導的PC12細胞損傷的神經保護作用及其機製.方法 用終濃度為0.01,0.10,1.00 μmol· L-1的CPU預處理30 min,然後加入SNP共同作用24 h.採用MTT法檢測細胞存活率,分光光度計法檢測乳痠脫氫酶(LDH)漏齣率、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的變化;流式細胞儀檢測活性氧(ROS)、線粒體膜電位和細胞凋亡率;Western蛋白質印跡法檢測Bcl-2、Bax和活化的胱天蛋白酶3蛋白錶達水平.結果 與細胞對照組比較,SNP模型組PC12細胞的存活率顯著降低,LDH的釋放明顯增加(P＜0.01),MDA生成增多,SOD活性降低,ROS水平升高,線粒體膜電位水平降低,細胞凋亡率由細胞對照組(1.20±0.14)％增加至(55.52±3.56)％(P＜0.01);Bcl-2蛋白錶達降低,而Bax錶達升高,Bax/Bcl-2比值升高,同時胱天蛋白酶3被激活(P＜0.01).與模型組比較,CPU 0.01,0.10和1.00μmol·L-1作用24 h後,細胞存活率顯著升高,LDH的釋放減少(P＜0.01),MDA的生成量減少,SOD活性增加,ROS纍積減少,線粒體膜電位水平升高(P＜0.01);凋亡細胞分彆降至(37.79±4.85)％,(22.31±4.25)％和(10.39±2.65)％;Bcl-2蛋白錶達增加,Bax和活化的胱天蛋白酶3錶達降低.結論 CPU對SNP所緻損傷的PC12細胞有一定的保護作用,其作用機製可能與其抗氧化和抗凋亡作用有關.
목적 탐토신형잉격소연생물3α-간기-3β-갑양기갑기-16,17-아갑기-잉치-20-동(CPU)대초보납(SNP)유도적PC12세포손상적신경보호작용급기궤제.방법 용종농도위0.01,0.10,1.00 μmol· L-1적CPU예처리30 min,연후가입SNP공동작용24 h.채용MTT법검측세포존활솔,분광광도계법검측유산탈경매(LDH)루출솔、병이철(MDA)함량화초양화물기화매(SOD)활성적변화;류식세포의검측활성양(ROS)、선립체막전위화세포조망솔;Western단백질인적법검측Bcl-2、Bax화활화적광천단백매3단백표체수평.결과 여세포대조조비교,SNP모형조PC12세포적존활솔현저강저,LDH적석방명현증가(P＜0.01),MDA생성증다,SOD활성강저,ROS수평승고,선립체막전위수평강저,세포조망솔유세포대조조(1.20±0.14)％증가지(55.52±3.56)％(P＜0.01);Bcl-2단백표체강저,이Bax표체승고,Bax/Bcl-2비치승고,동시광천단백매3피격활(P＜0.01).여모형조비교,CPU 0.01,0.10화1.00μmol·L-1작용24 h후,세포존활솔현저승고,LDH적석방감소(P＜0.01),MDA적생성량감소,SOD활성증가,ROS루적감소,선립체막전위수평승고(P＜0.01);조망세포분별강지(37.79±4.85)％,(22.31±4.25)％화(10.39±2.65)％;Bcl-2단백표체증가,Bax화활화적광천단백매3표체강저.결론 CPU대SNP소치손상적PC12세포유일정적보호작용,기작용궤제가능여기항양화화항조망작용유관.
