江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
Jiangsu Agricultural Sciences
2015年
9期
28-31
,共4页
栗小英%刘景坤%张艳俊%王海燕%刘大群
慄小英%劉景坤%張豔俊%王海燕%劉大群
률소영%류경곤%장염준%왕해연%류대군
叶锈菌%信号分子%病程相关蛋白 1%表达分析%原核表达
葉鏽菌%信號分子%病程相關蛋白 1%錶達分析%原覈錶達
협수균%신호분자%병정상관단백 1%표체분석%원핵표체
病程相关蛋白1(pathogenesis -related proteins1,PR1)是一类以基因家族形式存在的重要病程相关蛋白,在前期研究中,在小麦抗叶锈病近等基因系材料 TaLr35中成功获得了1个小麦病程相关蛋白1基因 TaLr35PR1,具有植物防御体系中的 SCP 保守结构域。利用生物信息学方法进一步明确,该基因含有信号肽,定位于细胞间隙,可能含有跨膜结构域,相对分子量为17.3 ku,与多个植物病程相关蛋白1序列具有较高同源性;利用半定量 RT -PCR 方法结合 genetools、SPSS 软件分析 TaLr35PR1基因表达模式,结果表明,信号分子水杨酸(salicylic acid,SA)、脱落酸(abscisic acid,ABA)明显诱导该基因表达,且用信号分子预处理后接种叶锈菌,基因表达量明显增加;构建了 TaLr35PR1基因的原核表达载体 pEASY -PR1,在大肠杆菌中高效表达分子量约为17 ku 的融合蛋白,明确其最佳诱导条件为在0.8 mmol/L IPTG 下于25℃诱导8 h。
病程相關蛋白1(pathogenesis -related proteins1,PR1)是一類以基因傢族形式存在的重要病程相關蛋白,在前期研究中,在小麥抗葉鏽病近等基因繫材料 TaLr35中成功穫得瞭1箇小麥病程相關蛋白1基因 TaLr35PR1,具有植物防禦體繫中的 SCP 保守結構域。利用生物信息學方法進一步明確,該基因含有信號肽,定位于細胞間隙,可能含有跨膜結構域,相對分子量為17.3 ku,與多箇植物病程相關蛋白1序列具有較高同源性;利用半定量 RT -PCR 方法結閤 genetools、SPSS 軟件分析 TaLr35PR1基因錶達模式,結果錶明,信號分子水楊痠(salicylic acid,SA)、脫落痠(abscisic acid,ABA)明顯誘導該基因錶達,且用信號分子預處理後接種葉鏽菌,基因錶達量明顯增加;構建瞭 TaLr35PR1基因的原覈錶達載體 pEASY -PR1,在大腸桿菌中高效錶達分子量約為17 ku 的融閤蛋白,明確其最佳誘導條件為在0.8 mmol/L IPTG 下于25℃誘導8 h。
병정상관단백1(pathogenesis -related proteins1,PR1)시일류이기인가족형식존재적중요병정상관단백,재전기연구중,재소맥항협수병근등기인계재료 TaLr35중성공획득료1개소맥병정상관단백1기인 TaLr35PR1,구유식물방어체계중적 SCP 보수결구역。이용생물신식학방법진일보명학,해기인함유신호태,정위우세포간극,가능함유과막결구역,상대분자량위17.3 ku,여다개식물병정상관단백1서렬구유교고동원성;이용반정량 RT -PCR 방법결합 genetools、SPSS 연건분석 TaLr35PR1기인표체모식,결과표명,신호분자수양산(salicylic acid,SA)、탈락산(abscisic acid,ABA)명현유도해기인표체,차용신호분자예처리후접충협수균,기인표체량명현증가;구건료 TaLr35PR1기인적원핵표체재체 pEASY -PR1,재대장간균중고효표체분자량약위17 ku 적융합단백,명학기최가유도조건위재0.8 mmol/L IPTG 하우25℃유도8 h。