西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
Journal of Xi'an Jiaotong University(Medical Sciences)
2015年
5期
682-686,714
,共6页
程妍%李阳%刘冬%宋亚华%张军%龚均
程妍%李暘%劉鼕%宋亞華%張軍%龔均
정연%리양%류동%송아화%장군%공균
贲门腺癌%激光捕获显微切割%蛋白质组学%分子标志物
賁門腺癌%激光捕穫顯微切割%蛋白質組學%分子標誌物
분문선암%격광포획현미절할%단백질조학%분자표지물
gastric cardia adenocarcinoma%laser capture microdissection%proteomics%biomarker
目的 联合导向激光捕获显微切割技术(NLCM)及蛋白质组学技术比较分析高分化贲门腺癌细胞和低分化贲门腺癌细胞的蛋白质表达图谱差异,寻找与贲门腺癌恶性程度和预后有关的分子标志物.方法 应用导向激光捕获显微切割技术分别获取高分化和低分化贲门腺癌细胞,提取蛋白质,应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离蛋白质,选定差异点,胶内酶解后,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(MALDL-TOF MS)鉴定差异蛋白质,并用免疫组化方法验证差异蛋白的表达.结果 ①NLCM分别分离纯化了高分化和低分化贲门腺癌细胞;②建立了高分化和低分化贲门腺癌细胞的蛋白质表达图谱,两组分别检测到(846±52)个和(923±84)个蛋白质点,两组的匹配率为85.4％;③对高分化和低分化的贲门腺癌蛋白质表达谱进行比较分析,鉴定出10种差异蛋白,其中6个蛋白质在低分化贲门腺癌细胞中表达上调,4个蛋白质在低分化贲门腺癌细胞中表达下调;④差异蛋白质涉及细胞间信号转导、细胞代谢、凋亡及迁移等;⑤进一步通过免疫组化方法验证了差异蛋白HSP27的表达与蛋白质组学研究结果一致.结论 高分化和低分化贲门腺癌间存在蛋白质表达的差异,这些差异表达的蛋白质可能与贲门腺癌的恶性程度和预后有关.
目的 聯閤導嚮激光捕穫顯微切割技術(NLCM)及蛋白質組學技術比較分析高分化賁門腺癌細胞和低分化賁門腺癌細胞的蛋白質錶達圖譜差異,尋找與賁門腺癌噁性程度和預後有關的分子標誌物.方法 應用導嚮激光捕穫顯微切割技術分彆穫取高分化和低分化賁門腺癌細胞,提取蛋白質,應用雙嚮凝膠電泳(2-DE)技術分離蛋白質,選定差異點,膠內酶解後,用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜技術(MALDL-TOF MS)鑒定差異蛋白質,併用免疫組化方法驗證差異蛋白的錶達.結果 ①NLCM分彆分離純化瞭高分化和低分化賁門腺癌細胞;②建立瞭高分化和低分化賁門腺癌細胞的蛋白質錶達圖譜,兩組分彆檢測到(846±52)箇和(923±84)箇蛋白質點,兩組的匹配率為85.4％;③對高分化和低分化的賁門腺癌蛋白質錶達譜進行比較分析,鑒定齣10種差異蛋白,其中6箇蛋白質在低分化賁門腺癌細胞中錶達上調,4箇蛋白質在低分化賁門腺癌細胞中錶達下調;④差異蛋白質涉及細胞間信號轉導、細胞代謝、凋亡及遷移等;⑤進一步通過免疫組化方法驗證瞭差異蛋白HSP27的錶達與蛋白質組學研究結果一緻.結論 高分化和低分化賁門腺癌間存在蛋白質錶達的差異,這些差異錶達的蛋白質可能與賁門腺癌的噁性程度和預後有關.
목적 연합도향격광포획현미절할기술(NLCM)급단백질조학기술비교분석고분화분문선암세포화저분화분문선암세포적단백질표체도보차이,심조여분문선암악성정도화예후유관적분자표지물.방법 응용도향격광포획현미절할기술분별획취고분화화저분화분문선암세포,제취단백질,응용쌍향응효전영(2-DE)기술분리단백질,선정차이점,효내매해후,용기질보조격광해석전리비행시간질보기술(MALDL-TOF MS)감정차이단백질,병용면역조화방법험증차이단백적표체.결과 ①NLCM분별분리순화료고분화화저분화분문선암세포;②건립료고분화화저분화분문선암세포적단백질표체도보,량조분별검측도(846±52)개화(923±84)개단백질점,량조적필배솔위85.4％;③대고분화화저분화적분문선암단백질표체보진행비교분석,감정출10충차이단백,기중6개단백질재저분화분문선암세포중표체상조,4개단백질재저분화분문선암세포중표체하조;④차이단백질섭급세포간신호전도、세포대사、조망급천이등;⑤진일보통과면역조화방법험증료차이단백HSP27적표체여단백질조학연구결과일치.결론 고분화화저분화분문선암간존재단백질표체적차이,저사차이표체적단백질가능여분문선암적악성정도화예후유관.
