安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
Journal of Anhui Agricultural Sciences
2015年
26期
21-23,72
,共4页
张庆勋%刘新生%方玉珍%王永录%张永光
張慶勛%劉新生%方玉珍%王永錄%張永光
장경훈%류신생%방옥진%왕영록%장영광
口蹄疫病毒%衣壳蛋白%检测
口蹄疫病毒%衣殼蛋白%檢測
구제역병독%의각단백%검측
Foot-and-mouth disease virus%Capsid protein%Detection
通过限制性酶切位点将P12A和3C基因插入到带有双启动子(Pp10和PPH)的杆状病毒表达载体pFastBacTM Dual,转化E.coli DH10感受态细胞进行蓝白斑筛选,将鉴定正确的重组杆状病毒质粒转染Sf9细胞后收获重组杆状病毒rBac-Dual-P12A3C,通过间接免疫荧光(IFA)和蛋白质印迹(Western-blot)检测衣壳蛋白的表达.IFA结果表明表达产物能够被A型FMDV猪抗阳性血清所识别,鉴定正确并具有良好反应原性.Western-blot检测到81 kD(P12A)、57 kD(VP0 +VP3)、47 kD(VP3+ VP1)、33 kD(VP0)和24 kD(VP1/VP3)5条蛋白条带,与预期相符.该研究为进一步研究A型口蹄疫病毒空衣壳的体外组装提供了试验依据.
通過限製性酶切位點將P12A和3C基因插入到帶有雙啟動子(Pp10和PPH)的桿狀病毒錶達載體pFastBacTM Dual,轉化E.coli DH10感受態細胞進行藍白斑篩選,將鑒定正確的重組桿狀病毒質粒轉染Sf9細胞後收穫重組桿狀病毒rBac-Dual-P12A3C,通過間接免疫熒光(IFA)和蛋白質印跡(Western-blot)檢測衣殼蛋白的錶達.IFA結果錶明錶達產物能夠被A型FMDV豬抗暘性血清所識彆,鑒定正確併具有良好反應原性.Western-blot檢測到81 kD(P12A)、57 kD(VP0 +VP3)、47 kD(VP3+ VP1)、33 kD(VP0)和24 kD(VP1/VP3)5條蛋白條帶,與預期相符.該研究為進一步研究A型口蹄疫病毒空衣殼的體外組裝提供瞭試驗依據.
통과한제성매절위점장P12A화3C기인삽입도대유쌍계동자(Pp10화PPH)적간상병독표체재체pFastBacTM Dual,전화E.coli DH10감수태세포진행람백반사선,장감정정학적중조간상병독질립전염Sf9세포후수획중조간상병독rBac-Dual-P12A3C,통과간접면역형광(IFA)화단백질인적(Western-blot)검측의각단백적표체.IFA결과표명표체산물능구피A형FMDV저항양성혈청소식별,감정정학병구유량호반응원성.Western-blot검측도81 kD(P12A)、57 kD(VP0 +VP3)、47 kD(VP3+ VP1)、33 kD(VP0)화24 kD(VP1/VP3)5조단백조대,여예기상부.해연구위진일보연구A형구제역병독공의각적체외조장제공료시험의거.
