北京大学学报（医学版）
北京大學學報（醫學版）
북경대학학보（의학판）
Journal of Peking University(Health Sciences)
2015年
4期
661-666
,共6页
肖宗宇%陈晓娟%杨艺%徐如祥
肖宗宇%陳曉娟%楊藝%徐如祥
초종우%진효연%양예%서여상
脑肿瘤%肿瘤干细胞%树突细胞%免疫疗法%神经胶质瘤
腦腫瘤%腫瘤榦細胞%樹突細胞%免疫療法%神經膠質瘤
뇌종류%종류간세포%수돌세포%면역요법%신경효질류
Brain neoplasms%Neoplastic stem cells%Dendritic cells%Immunotherapy%Glioma
目的:利用大鼠9L肿瘤干细胞样细胞(cancer stem like cells,CSLCs)总RNA致敏树突状细胞(dendritic cells,DC)治疗9L/F344大鼠颅内胶质瘤,观察DC疫苗对脑胶质瘤的治疗作用,探讨其免疫反应的机制,为DC疫苗的临床应用提供实验基础.方法:40只颅内荷瘤F344大鼠随机分成4组,每组10只,作为实验组:(1)树突状细胞组(DC-9L):注射转染贴壁9L细胞RNA的DC组;(2)DC-9LTS组:注射转染9L肿瘤球RNA的DC组;(3)DC组:注射未经转染RNA;(4)磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)组:注射100μL PBS.非荷瘤F344大鼠10只设为对照组,仅在右侧尾状核注射10 μL DMEM/F12培养基.利用大鼠9L肿瘤干细胞样细胞的总RNA致敏DC,制备DC-9LTS,采用皮下注射的方式,对9L/F344大鼠颅内胶质瘤模型进行免疫治疗,观察荷瘤大鼠生存期,同时检测血清干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)的浓度,免疫组织化学染色对各治疗组肿瘤组织CD4 、CD8淋巴细胞浸润情况进行分析.结果:各实验组大鼠的中位生存期分别为:PBS组21 d,DC组为21 d,DC-9L组为31 d,DC-9LTS组为36 d.DC-9LTS组大鼠的中位生存期与其余各组比较,差异有统计学意义(P ＜0.01);DC-9L组与DC组、PBS组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);而DC组与PBS组之间差异无统计学意义(x2=0.071,P=0.789),DC-9LTS组的IFN-γ浓度为(157.08 ±7.25) ng/L,高于其余各组(P＜0.05),且大鼠肿瘤组织内部及瘤周组织均有大量CD8淋巴细胞浸润.DC-9L组中,在肿瘤组织内部及瘤周也可见CD8淋巴细胞浸润,DC-9LTS组CD8的平均光密度值(D)明显高于DC-9L组(P＜0.001),DC-9LTS组及DC-9L组均未见CD4淋巴细胞的表达.在DC组和PBS组中,肿瘤组织中未见CD4或CD8淋巴细胞浸润.结论:利用大鼠9L肿瘤干细胞样细胞总RNA体外致敏树突状细胞,制备树突状细胞疫苗,回输治疗9L/F344大鼠颅内胶质瘤,能明显延长荷瘤大鼠生存期,为靶向性杀伤脑肿瘤干细胞的胶质瘤免疫治疗提供了实验基础及理论依据.
目的:利用大鼠9L腫瘤榦細胞樣細胞(cancer stem like cells,CSLCs)總RNA緻敏樹突狀細胞(dendritic cells,DC)治療9L/F344大鼠顱內膠質瘤,觀察DC疫苗對腦膠質瘤的治療作用,探討其免疫反應的機製,為DC疫苗的臨床應用提供實驗基礎.方法:40隻顱內荷瘤F344大鼠隨機分成4組,每組10隻,作為實驗組:(1)樹突狀細胞組(DC-9L):註射轉染貼壁9L細胞RNA的DC組;(2)DC-9LTS組:註射轉染9L腫瘤毬RNA的DC組;(3)DC組:註射未經轉染RNA;(4)燐痠鹽緩遲液(phosphate buffered saline,PBS)組:註射100μL PBS.非荷瘤F344大鼠10隻設為對照組,僅在右側尾狀覈註射10 μL DMEM/F12培養基.利用大鼠9L腫瘤榦細胞樣細胞的總RNA緻敏DC,製備DC-9LTS,採用皮下註射的方式,對9L/F344大鼠顱內膠質瘤模型進行免疫治療,觀察荷瘤大鼠生存期,同時檢測血清榦擾素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)的濃度,免疫組織化學染色對各治療組腫瘤組織CD4 、CD8淋巴細胞浸潤情況進行分析.結果:各實驗組大鼠的中位生存期分彆為:PBS組21 d,DC組為21 d,DC-9L組為31 d,DC-9LTS組為36 d.DC-9LTS組大鼠的中位生存期與其餘各組比較,差異有統計學意義(P ＜0.01);DC-9L組與DC組、PBS組比較,差異有統計學意義(P＜0.01);而DC組與PBS組之間差異無統計學意義(x2=0.071,P=0.789),DC-9LTS組的IFN-γ濃度為(157.08 ±7.25) ng/L,高于其餘各組(P＜0.05),且大鼠腫瘤組織內部及瘤週組織均有大量CD8淋巴細胞浸潤.DC-9L組中,在腫瘤組織內部及瘤週也可見CD8淋巴細胞浸潤,DC-9LTS組CD8的平均光密度值(D)明顯高于DC-9L組(P＜0.001),DC-9LTS組及DC-9L組均未見CD4淋巴細胞的錶達.在DC組和PBS組中,腫瘤組織中未見CD4或CD8淋巴細胞浸潤.結論:利用大鼠9L腫瘤榦細胞樣細胞總RNA體外緻敏樹突狀細胞,製備樹突狀細胞疫苗,迴輸治療9L/F344大鼠顱內膠質瘤,能明顯延長荷瘤大鼠生存期,為靶嚮性殺傷腦腫瘤榦細胞的膠質瘤免疫治療提供瞭實驗基礎及理論依據.
목적:이용대서9L종류간세포양세포(cancer stem like cells,CSLCs)총RNA치민수돌상세포(dendritic cells,DC)치료9L/F344대서로내효질류,관찰DC역묘대뇌효질류적치료작용,탐토기면역반응적궤제,위DC역묘적림상응용제공실험기출.방법:40지로내하류F344대서수궤분성4조,매조10지,작위실험조:(1)수돌상세포조(DC-9L):주사전염첩벽9L세포RNA적DC조;(2)DC-9LTS조:주사전염9L종류구RNA적DC조;(3)DC조:주사미경전염RNA;(4)린산염완충액(phosphate buffered saline,PBS)조:주사100μL PBS.비하류F344대서10지설위대조조,부재우측미상핵주사10 μL DMEM/F12배양기.이용대서9L종류간세포양세포적총RNA치민DC,제비DC-9LTS,채용피하주사적방식,대9L/F344대서로내효질류모형진행면역치료,관찰하류대서생존기,동시검측혈청간우소-γ(interferon-gamma,IFN-γ)적농도,면역조직화학염색대각치료조종류조직CD4 、CD8림파세포침윤정황진행분석.결과:각실험조대서적중위생존기분별위:PBS조21 d,DC조위21 d,DC-9L조위31 d,DC-9LTS조위36 d.DC-9LTS조대서적중위생존기여기여각조비교,차이유통계학의의(P ＜0.01);DC-9L조여DC조、PBS조비교,차이유통계학의의(P＜0.01);이DC조여PBS조지간차이무통계학의의(x2=0.071,P=0.789),DC-9LTS조적IFN-γ농도위(157.08 ±7.25) ng/L,고우기여각조(P＜0.05),차대서종류조직내부급류주조직균유대량CD8림파세포침윤.DC-9L조중,재종류조직내부급류주야가견CD8림파세포침윤,DC-9LTS조CD8적평균광밀도치(D)명현고우DC-9L조(P＜0.001),DC-9LTS조급DC-9L조균미견CD4림파세포적표체.재DC조화PBS조중,종류조직중미견CD4혹CD8림파세포침윤.결론:이용대서9L종류간세포양세포총RNA체외치민수돌상세포,제비수돌상세포역묘,회수치료9L/F344대서로내효질류,능명현연장하류대서생존기,위파향성살상뇌종류간세포적효질류면역치료제공료실험기출급이론의거.
