中国医药工业杂志
中國醫藥工業雜誌
중국의약공업잡지
Chinese Journal of Pharmaceuticals
2015年
10期
1080-1086
,共7页
王敏%田慧慧%陈荆晓%陈敬华
王敏%田慧慧%陳荊曉%陳敬華
왕민%전혜혜%진형효%진경화
基因载体%聚乙烯亚胺%透明质酸%组氨酸%pEGFP-N1%基因转染
基因載體%聚乙烯亞胺%透明質痠%組氨痠%pEGFP-N1%基因轉染
기인재체%취을희아알%투명질산%조안산%pEGFP-N1%기인전염
gene carrier%polyethyleneimine%hyaluronic acid%histidine%plasmid enhanced green fluorescent protein-N1 (pEGFP-N1)%gene transfection
用组氨酸分别修饰聚乙烯亚胺(PEI)和透明质酸,得到了聚乙烯亚胺-组氨酸(PEI-His)和透明质酸-组氨酸(HA-His).然后将PEI-His与增强型绿色荧光蛋白质粒DNA (pEGFP-N1)复合形成PEI-His/DNA复合物(PD复合物),并进一步在其表面吸附HA-His形成具有双层结构和负电屏障的(PEI-His/DNA)/HA-His复合物(HPD复合物),用于基因传递研究.透射电镜观察到HPD复合物为球形纳米粒子,水化后平均粒径约为142 nm,ζ电位为-28.9 mV.HPD复合物中加入10％胎牛血清后平均粒径为135 nm,ζ电位为-25.8 mV,提示其具有良好的血清稳定性.HPD复合物对pEGFP-N1的包载效率为(91.9+115)％,并可有效保护DNA不被DNase I降解.在PEI浓度5～20 μg/ml范围内,HPD复合物的细胞毒性明显低于PEI/DNA复合物,前者细胞存活率可维持在80％以上;同时,它可介导DNA进入细胞实现基因转染,转染效率为2.88％.
用組氨痠分彆脩飾聚乙烯亞胺(PEI)和透明質痠,得到瞭聚乙烯亞胺-組氨痠(PEI-His)和透明質痠-組氨痠(HA-His).然後將PEI-His與增彊型綠色熒光蛋白質粒DNA (pEGFP-N1)複閤形成PEI-His/DNA複閤物(PD複閤物),併進一步在其錶麵吸附HA-His形成具有雙層結構和負電屏障的(PEI-His/DNA)/HA-His複閤物(HPD複閤物),用于基因傳遞研究.透射電鏡觀察到HPD複閤物為毬形納米粒子,水化後平均粒徑約為142 nm,ζ電位為-28.9 mV.HPD複閤物中加入10％胎牛血清後平均粒徑為135 nm,ζ電位為-25.8 mV,提示其具有良好的血清穩定性.HPD複閤物對pEGFP-N1的包載效率為(91.9+115)％,併可有效保護DNA不被DNase I降解.在PEI濃度5～20 μg/ml範圍內,HPD複閤物的細胞毒性明顯低于PEI/DNA複閤物,前者細胞存活率可維持在80％以上;同時,它可介導DNA進入細胞實現基因轉染,轉染效率為2.88％.
용조안산분별수식취을희아알(PEI)화투명질산,득도료취을희아알-조안산(PEI-His)화투명질산-조안산(HA-His).연후장PEI-His여증강형록색형광단백질립DNA (pEGFP-N1)복합형성PEI-His/DNA복합물(PD복합물),병진일보재기표면흡부HA-His형성구유쌍층결구화부전병장적(PEI-His/DNA)/HA-His복합물(HPD복합물),용우기인전체연구.투사전경관찰도HPD복합물위구형납미입자,수화후평균립경약위142 nm,ζ전위위-28.9 mV.HPD복합물중가입10％태우혈청후평균립경위135 nm,ζ전위위-25.8 mV,제시기구유량호적혈청은정성.HPD복합물대pEGFP-N1적포재효솔위(91.9+115)％,병가유효보호DNA불피DNase I강해.재PEI농도5～20 μg/ml범위내,HPD복합물적세포독성명현저우PEI/DNA복합물,전자세포존활솔가유지재80％이상;동시,타가개도DNA진입세포실현기인전염,전염효솔위2.88％.
