复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
Fudan University Journal of Medical Sciences
2015年
5期
607-612,627
,共7页
张亚东%卢涵宇%陈亮%李晓波%殷莲华%王松梅
張亞東%盧涵宇%陳亮%李曉波%慇蓮華%王鬆梅
장아동%로함우%진량%리효파%은련화%왕송매
类胰蛋白酶%PAR2%巨噬细胞M1/M2%JAK-STAT%小鼠
類胰蛋白酶%PAR2%巨噬細胞M1/M2%JAK-STAT%小鼠
류이단백매%PAR2%거서세포M1/M2%JAK-STAT%소서
tryptase%PAR2%macrophage M1/M2%JAK-STAT%mouse
目的 研究类胰蛋白酶促进小鼠巨噬细胞表型转换的作用及其机制.方法 体外分离培养小鼠巨噬细胞(对照组),并诱导为M1和M2亚型,经类胰蛋白酶和PAR2激动剂分别作用后,通过real-time PCR和Western blot检测巨噬细胞亚型标志物以及JAK STAT信号通路的变化.结果 成功分离培养小鼠骨髓来源的巨噬细胞,并诱导其分化为M1和M2亚型.PAR2激动剂(2-Furoyl LIGRLO-amide)和类胰蛋白酶分别与M1型巨噬细胞分别作用后,M1型标记物iNOS和IL-12高于对照组,而M2型标记物arg1和mrc1与对照相比无明显变化,提示类胰蛋白酶和PAR2激动剂可以促进巨噬细胞向M1型转化,而不会促进M1型向M2型转化.PAR2激动剂和类胰蛋白酶分别与M2型巨噬细胞作用后,M2型标记物arg1和mrc1明显下降,而M1型标记物iNOS和iL-12有所增加,提示类胰蛋白酶和PAR-2激动剂均可促进M2型向M1型转化.类胰蛋白酶作用于M1型巨噬细胞后,JAK2磷酸化水平、STAT和pSTAT的表达水平均无明显变化.类胰蛋白酶作用于M2型巨噬细胞后,JAK2的磷酸化随着时间延长明显升高,STAT的磷酸化水平同时升高,提示类胰蛋白酶可以通过和PAR-2结合而激活JAK2-STAT信号通路,进而引起M2型向M1型转化.结论 类胰蛋白酶可能通过与其受体PAR2相互作用后激活JAK-STAT通路,促进小鼠骨髓来源的巨噬细胞向M1亚型转化,起到促进炎症发展的作用,从而进一步加重动脉粥样硬化的发展.
目的 研究類胰蛋白酶促進小鼠巨噬細胞錶型轉換的作用及其機製.方法 體外分離培養小鼠巨噬細胞(對照組),併誘導為M1和M2亞型,經類胰蛋白酶和PAR2激動劑分彆作用後,通過real-time PCR和Western blot檢測巨噬細胞亞型標誌物以及JAK STAT信號通路的變化.結果 成功分離培養小鼠骨髓來源的巨噬細胞,併誘導其分化為M1和M2亞型.PAR2激動劑(2-Furoyl LIGRLO-amide)和類胰蛋白酶分彆與M1型巨噬細胞分彆作用後,M1型標記物iNOS和IL-12高于對照組,而M2型標記物arg1和mrc1與對照相比無明顯變化,提示類胰蛋白酶和PAR2激動劑可以促進巨噬細胞嚮M1型轉化,而不會促進M1型嚮M2型轉化.PAR2激動劑和類胰蛋白酶分彆與M2型巨噬細胞作用後,M2型標記物arg1和mrc1明顯下降,而M1型標記物iNOS和iL-12有所增加,提示類胰蛋白酶和PAR-2激動劑均可促進M2型嚮M1型轉化.類胰蛋白酶作用于M1型巨噬細胞後,JAK2燐痠化水平、STAT和pSTAT的錶達水平均無明顯變化.類胰蛋白酶作用于M2型巨噬細胞後,JAK2的燐痠化隨著時間延長明顯升高,STAT的燐痠化水平同時升高,提示類胰蛋白酶可以通過和PAR-2結閤而激活JAK2-STAT信號通路,進而引起M2型嚮M1型轉化.結論 類胰蛋白酶可能通過與其受體PAR2相互作用後激活JAK-STAT通路,促進小鼠骨髓來源的巨噬細胞嚮M1亞型轉化,起到促進炎癥髮展的作用,從而進一步加重動脈粥樣硬化的髮展.
목적 연구류이단백매촉진소서거서세포표형전환적작용급기궤제.방법 체외분리배양소서거서세포(대조조),병유도위M1화M2아형,경류이단백매화PAR2격동제분별작용후,통과real-time PCR화Western blot검측거서세포아형표지물이급JAK STAT신호통로적변화.결과 성공분리배양소서골수래원적거서세포,병유도기분화위M1화M2아형.PAR2격동제(2-Furoyl LIGRLO-amide)화류이단백매분별여M1형거서세포분별작용후,M1형표기물iNOS화IL-12고우대조조,이M2형표기물arg1화mrc1여대조상비무명현변화,제시류이단백매화PAR2격동제가이촉진거서세포향M1형전화,이불회촉진M1형향M2형전화.PAR2격동제화류이단백매분별여M2형거서세포작용후,M2형표기물arg1화mrc1명현하강,이M1형표기물iNOS화iL-12유소증가,제시류이단백매화PAR-2격동제균가촉진M2형향M1형전화.류이단백매작용우M1형거서세포후,JAK2린산화수평、STAT화pSTAT적표체수평균무명현변화.류이단백매작용우M2형거서세포후,JAK2적린산화수착시간연장명현승고,STAT적린산화수평동시승고,제시류이단백매가이통과화PAR-2결합이격활JAK2-STAT신호통로,진이인기M2형향M1형전화.결론 류이단백매가능통과여기수체PAR2상호작용후격활JAK-STAT통로,촉진소서골수래원적거서세포향M1아형전화,기도촉진염증발전적작용,종이진일보가중동맥죽양경화적발전.
