医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
Journal of Medical Research
2015年
9期
57-59,62
,共4页
崔红霞%王明%赵学梅%邹宇%张奇
崔紅霞%王明%趙學梅%鄒宇%張奇
최홍하%왕명%조학매%추우%장기
α2,3-ST%绿色荧光蛋白%转染%表达
α2,3-ST%綠色熒光蛋白%轉染%錶達
α2,3-ST%록색형광단백%전염%표체
α2,3-ST%Green fluorescent protein%Transfection%Expression
目的 慢病毒载体法建立乳腺癌GFP-ST3稳定细胞株.方法 采用PCR扩增α2,3-ST全长基因片段,克隆至慢病毒载体进行测序分析,将重组慢病毒载体转染人乳腺癌细胞,嘌呤霉素抗性筛选,经荧光显微镜观察、实时定量PCR、West-ern blot检测α2,3-ST的表达.结果 成功构建了慢病毒载体pGLV5-H1-GFP-ST3,体外转染乳腺癌细胞后,荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白的表达,α2,3-STmRNA表达和蛋白水平均明显升高(P＜0.05),获得稳转细胞株.结论 成功构建了绿色荧光蛋白为报告基因的α2,3-ST慢病毒载体,并在MDA-MB-231中稳定表达,为进一步研究乳腺癌细胞膜连α2,3-唾液酸水平增高与其侵袭和转移潜能的调控提供实验模型.
目的 慢病毒載體法建立乳腺癌GFP-ST3穩定細胞株.方法 採用PCR擴增α2,3-ST全長基因片段,剋隆至慢病毒載體進行測序分析,將重組慢病毒載體轉染人乳腺癌細胞,嘌呤黴素抗性篩選,經熒光顯微鏡觀察、實時定量PCR、West-ern blot檢測α2,3-ST的錶達.結果 成功構建瞭慢病毒載體pGLV5-H1-GFP-ST3,體外轉染乳腺癌細胞後,熒光顯微鏡下可見綠色熒光蛋白的錶達,α2,3-STmRNA錶達和蛋白水平均明顯升高(P＜0.05),穫得穩轉細胞株.結論 成功構建瞭綠色熒光蛋白為報告基因的α2,3-ST慢病毒載體,併在MDA-MB-231中穩定錶達,為進一步研究乳腺癌細胞膜連α2,3-唾液痠水平增高與其侵襲和轉移潛能的調控提供實驗模型.
목적 만병독재체법건립유선암GFP-ST3은정세포주.방법 채용PCR확증α2,3-ST전장기인편단,극륭지만병독재체진행측서분석,장중조만병독재체전염인유선암세포,표령매소항성사선,경형광현미경관찰、실시정량PCR、West-ern blot검측α2,3-ST적표체.결과 성공구건료만병독재체pGLV5-H1-GFP-ST3,체외전염유선암세포후,형광현미경하가견록색형광단백적표체,α2,3-STmRNA표체화단백수평균명현승고(P＜0.05),획득은전세포주.결론 성공구건료록색형광단백위보고기인적α2,3-ST만병독재체,병재MDA-MB-231중은정표체,위진일보연구유선암세포막련α2,3-타액산수평증고여기침습화전이잠능적조공제공실험모형.
