中国兽药杂志
中國獸藥雜誌
중국수약잡지
Chinese Journal of Veterinary Drug
2015年
9期
7-10
,共4页
曲光刚%李佃场%李茂峰%金婷婷%武曰星%王长江%刘博%高三阳
麯光剛%李佃場%李茂峰%金婷婷%武曰星%王長江%劉博%高三暘
곡광강%리전장%리무봉%금정정%무왈성%왕장강%류박%고삼양
新城疫病毒%F蛋白%原核表达%反应原性
新城疫病毒%F蛋白%原覈錶達%反應原性
신성역병독%F단백%원핵표체%반응원성
Newcastle disease virus%fusion protein%prokaryotic expression%reactogenicity
为分析新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)及其突变体(Fm)基因的反应原性,以携带有NDV-F和NDV-Fm基因的质粒为模板设计引物,PCR扩增产物经双酶切后分别连入原核表达载体pET-SUMO、pET-28a,构建重组质粒pET-SUMO-F、pET-28a-Fm,将重组质粒转化入宿主菌Rosetta 2感受态细胞,在IPTG诱导下表达.SDS-PAGE和Western blotting结果显示,NDV-F和NDV-Fm在原核系统中表达后分别获得了相对分子量为64.7 kD和48.7 kD的重组蛋白;重组蛋白能被抗NDV鸡阳性血清识别.试验表明,NDV-F和NDV-Fm可以在原核系统中表达,且具有良好的反应原性.
為分析新城疫病毒(NDV)融閤蛋白(F)及其突變體(Fm)基因的反應原性,以攜帶有NDV-F和NDV-Fm基因的質粒為模闆設計引物,PCR擴增產物經雙酶切後分彆連入原覈錶達載體pET-SUMO、pET-28a,構建重組質粒pET-SUMO-F、pET-28a-Fm,將重組質粒轉化入宿主菌Rosetta 2感受態細胞,在IPTG誘導下錶達.SDS-PAGE和Western blotting結果顯示,NDV-F和NDV-Fm在原覈繫統中錶達後分彆穫得瞭相對分子量為64.7 kD和48.7 kD的重組蛋白;重組蛋白能被抗NDV鷄暘性血清識彆.試驗錶明,NDV-F和NDV-Fm可以在原覈繫統中錶達,且具有良好的反應原性.
위분석신성역병독(NDV)융합단백(F)급기돌변체(Fm)기인적반응원성,이휴대유NDV-F화NDV-Fm기인적질립위모판설계인물,PCR확증산물경쌍매절후분별련입원핵표체재체pET-SUMO、pET-28a,구건중조질립pET-SUMO-F、pET-28a-Fm,장중조질립전화입숙주균Rosetta 2감수태세포,재IPTG유도하표체.SDS-PAGE화Western blotting결과현시,NDV-F화NDV-Fm재원핵계통중표체후분별획득료상대분자량위64.7 kD화48.7 kD적중조단백;중조단백능피항NDV계양성혈청식별.시험표명,NDV-F화NDV-Fm가이재원핵계통중표체,차구유량호적반응원성.
