CAJ | 학술논문

为了阐明水牛ASAH1基因在水牛卵泡发生和胚胎发生过程中的作用及分子机制,采用RT-PCR及载体构建技术对ASAH1进行了研究.结果表明:水牛ASAH1基因的编码区全长993 bp,共编码330个氨基酸.多重序列比较分析显示水牛ASAH1核苷酸序列与牛、山羊、绵羊、猪、马、人和非洲象相应序列的相似性分别为99％、97％、96％、90％、90％、89％和87％,结合系统进化树分析结果,ASAH1基因在不同物种以及进化的过程中具有高度保守性.对ASAH1蛋白质的分析表明:该蛋白呈弱酸性,无信号肽,细胞亚定位于溶酶体,存在NAAA-beta和Ntn_ AC_NAAA结构域.成功构建水牛ASAH1基因真核表达载体,转染293T和CHO细胞系后,均能够正确形成ASAH1-EGFP融合蛋白,产生绿色荧光信号.我们的结果为今后阐明ASAH1基因在水牛水牛卵泡发生和胚胎发生过程中的作用及分子机制奠定了理论基础.
위료천명수우ASAH1기인재수우란포발생화배태발생과정중적작용급분자궤제,채용RT-PCR급재체구건기술대ASAH1진행료연구.결과표명:수우ASAH1기인적편마구전장993 bp,공편마330개안기산.다중서렬비교분석현시수우ASAH1핵감산서렬여우、산양、면양、저、마、인화비주상상응서렬적상사성분별위99％、97％、96％、90％、90％、89％화87％,결합계통진화수분석결과,ASAH1기인재불동물충이급진화적과정중구유고도보수성.대ASAH1단백질적분석표명:해단백정약산성,무신호태,세포아정위우용매체,존재NAAA-beta화Ntn_ AC_NAAA결구역.성공구건수우ASAH1기인진핵표체재체,전염293T화CHO세포계후,균능구정학형성ASAH1-EGFP융합단백,산생록색형광신호.아문적결과위금후천명ASAH1기인재수우수우란포발생화배태발생과정중적작용급분자궤제전정료이론기출.