中国海洋大学学报（自然科学版）
中國海洋大學學報（自然科學版）
중국해양대학학보（자연과학판）
Periodical of Ocean University of China
2015年
10期
31-35
,共5页
王丽丽%朱葆华%杨官品%潘克厚
王麗麗%硃葆華%楊官品%潘剋厚
왕려려%주보화%양관품%반극후
微拟球藻%硫脂酶%脂肪酸%大肠杆菌%原核表达
微擬毬藻%硫脂酶%脂肪痠%大腸桿菌%原覈錶達
미의구조%류지매%지방산%대장간균%원핵표체
Nannochloropsis oceanica%thioesterase%fatty acid%Escherichia coli%prokaryotic expression
微拟球藻(Nannochloropsis oceanica)基因组序列注释的硫脂酶基因(NoTE)长1 314 bp,其编码的硫脂酶长437氨基酸,与其他物种硫脂酶序列相似性较低.为验证其功能,将NoTE克隆到原核表达载体pET-30a上并在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了表达.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测到预期大小的蛋白质条带.气相色谱(GC)分析显示,表达NoTE未改变大肠杆菌脂肪酸种类,但改变了其总脂肪酸含量和脂肪酸比例,其C14:1、C16:0、C16:1、C18:1及总脂肪酸含量较不含重组质粒菌株分别提高了11％、18％、32％、49％和30％.研究结果证明了克隆的硫脂酶基因能在大肠杆菌中表达并具有相应的酶活性.
微擬毬藻(Nannochloropsis oceanica)基因組序列註釋的硫脂酶基因(NoTE)長1 314 bp,其編碼的硫脂酶長437氨基痠,與其他物種硫脂酶序列相似性較低.為驗證其功能,將NoTE剋隆到原覈錶達載體pET-30a上併在大腸桿菌BL21(DE3)中實現瞭錶達.聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)檢測到預期大小的蛋白質條帶.氣相色譜(GC)分析顯示,錶達NoTE未改變大腸桿菌脂肪痠種類,但改變瞭其總脂肪痠含量和脂肪痠比例,其C14:1、C16:0、C16:1、C18:1及總脂肪痠含量較不含重組質粒菌株分彆提高瞭11％、18％、32％、49％和30％.研究結果證明瞭剋隆的硫脂酶基因能在大腸桿菌中錶達併具有相應的酶活性.
미의구조(Nannochloropsis oceanica)기인조서렬주석적류지매기인(NoTE)장1 314 bp,기편마적류지매장437안기산,여기타물충류지매서렬상사성교저.위험증기공능,장NoTE극륭도원핵표체재체pET-30a상병재대장간균BL21(DE3)중실현료표체.취병희선알응효전영(SDS-PAGE)검측도예기대소적단백질조대.기상색보(GC)분석현시,표체NoTE미개변대장간균지방산충류,단개변료기총지방산함량화지방산비례,기C14:1、C16:0、C16:1、C18:1급총지방산함량교불함중조질립균주분별제고료11％、18％、32％、49％화30％.연구결과증명료극륭적류지매기인능재대장간균중표체병구유상응적매활성.
