食品科学
食品科學
식품과학
Food Science
2015年
17期
169-172
,共4页
杨建远%李静%范亚苇%张炳火%邓泽元
楊建遠%李靜%範亞葦%張炳火%鄧澤元
양건원%리정%범아위%장병화%산택원
粗壮脉纹孢菌%原生质体%制备%再生%转化
粗壯脈紋孢菌%原生質體%製備%再生%轉化
조장맥문포균%원생질체%제비%재생%전화
Neurospora crassa%protoplasts%production%regeneration%transformation
为建立原生质体介导的粗壮脉纹孢菌遗传转化系统,本研究主要考察了复合酶解液、菌龄及酶解时间对粗壮脉纹胞菌原生质体生成及再生的影响.结果表明,粗壮脉纹胞菌孢子悬液接种在马铃薯葡萄糖琼脂(potato dextrose agar,PDA)液体培养基中,30℃条件下摇床培养10h的菌丝,采用0.5 g/100mL蜗牛酶+0.5 g/100 mL溶壁酶+1 g/100 mL纤维素酶的复合酶解液、30℃条件下酶解10h,粗壮脉纹胞菌原生质体生成及再生最为适合.在此条件下,原生质体生成数可达4.53×106个,38#-再生培养基中的再生数可达1.41×106个,再生率达31.71％,聚乙二醇介导PAKHB载体转化NC原生质体,每微克质粒可获得8个以上的转化子.
為建立原生質體介導的粗壯脈紋孢菌遺傳轉化繫統,本研究主要攷察瞭複閤酶解液、菌齡及酶解時間對粗壯脈紋胞菌原生質體生成及再生的影響.結果錶明,粗壯脈紋胞菌孢子懸液接種在馬鈴藷葡萄糖瓊脂(potato dextrose agar,PDA)液體培養基中,30℃條件下搖床培養10h的菌絲,採用0.5 g/100mL蝸牛酶+0.5 g/100 mL溶壁酶+1 g/100 mL纖維素酶的複閤酶解液、30℃條件下酶解10h,粗壯脈紋胞菌原生質體生成及再生最為適閤.在此條件下,原生質體生成數可達4.53×106箇,38#-再生培養基中的再生數可達1.41×106箇,再生率達31.71％,聚乙二醇介導PAKHB載體轉化NC原生質體,每微剋質粒可穫得8箇以上的轉化子.
위건립원생질체개도적조장맥문포균유전전화계통,본연구주요고찰료복합매해액、균령급매해시간대조장맥문포균원생질체생성급재생적영향.결과표명,조장맥문포균포자현액접충재마령서포도당경지(potato dextrose agar,PDA)액체배양기중,30℃조건하요상배양10h적균사,채용0.5 g/100mL와우매+0.5 g/100 mL용벽매+1 g/100 mL섬유소매적복합매해액、30℃조건하매해10h,조장맥문포균원생질체생성급재생최위괄합.재차조건하,원생질체생성수가체4.53×106개,38#-재생배양기중적재생수가체1.41×106개,재생솔체31.71％,취을이순개도PAKHB재체전화NC원생질체,매미극질립가획득8개이상적전화자.
